菌株Bacillus sp.50-3产角蛋白酶的发酵工艺优化及纯化

岳晓禹; 崔丽伟; 常惟丹; 李长滨; 李欣; 许文涛

畜牧与兽医 ›› 2025, Vol. 57 ›› Issue (12) : 27 -33.

岳晓禹, 崔丽伟, 常惟丹, 李长滨, 李欣, 许文涛

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摘要

旨在优化菌株Bacillus sp.50-3产角蛋白酶的发酵工艺及纯化。研究不同发酵条件对菌株Bacillus sp.50-3产角蛋白酶的影响，采用硫酸铵沉淀和阴离子交换柱层析对酶进行分离纯化。结果：角蛋白酶最佳发酵条件为60 mL/300 mL、pH=8.0、种龄12 h、接种量2%、温度37℃、140 r/min摇床培养36 h; 40%～80%的硫酸铵沉淀可以去除发酵酶液中的大部分杂蛋白，通过DEAE-Sephadex-A50阴离子交换柱层析，经SDS-PAGE,考马斯亮蓝染色得到一条电泳条带，分子量约为30 kDa,经酶活性电泳检测具有角蛋白酶活力。综上，该研究结果对角蛋白酶在工业生产中的推广应用具有重要的参考价值。