猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

摘要

本研究旨在制备猪圆环病毒2型（PCV2）衣壳蛋白（Cap）的单克隆抗体，并对其识别的抗原表位进行鉴定，为Cap蛋白结构和中和抗原表位特性的研究提供数据支持。试验通过细胞杂交瘤技术，共筛选出6株单克隆抗体，命名为2B6、3D4、3F6、4C4、5G4和6A7。经酶联免疫吸附试验（ELISA）检测，所有单抗杂交瘤细胞传代稳定，小鼠腹水单抗效价达最高达1∶1.28×10～7。Western blot及间接免疫荧光试验（IFA）鉴定抗体特异性及中和活性，结果显示单抗均能特异性识别PCV2,且2B6和4C4单抗具有PCV2中和活性，中和效价均为1∶128。进一步利用Western blot鉴定单抗识别的抗原表位，结果表明，2B6、3D4、3F6和6A7识别抗原表位²⁰³ENSIYDQDYN²¹²,4C4和5G4识别抗原表位²²³EFNLKDPPLNPK²³⁴。综上，本试验成功筛选出2株具有PCV2中和活性的单抗，并鉴定其识别的抗原表位，为后续阐明PCV2的致病机制、表位疫苗设计等奠定基础。

关键词

猪圆环病毒2型 / 衣壳蛋白 / 单克隆抗体 / 中和活性 / 抗原表位鉴定