‘京枣39’叶片遗传转化体系的建立

摘要

为建立‘京枣39’高效遗传转化体系，以‘京枣39’叶片为外植体进行遗传转化，探究卡那霉素（kanamycin,Kan）质量浓度、头孢噻肟（cefotaxime, Cef）和特美汀（timentin, Tim）抑菌质量浓度、预培养时间、不同菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮（acetosyringone, AS）浓度及共培养时间对‘京枣39’叶片转化率的影响。结果显示‘，京枣39’叶片最佳遗传转化条件为，5 mg/L Kan选择压，50 mg/L Cef、250 mg/L Tim抑菌质量浓度，预培养4 d，农杆菌菌液OD600 nm值为0.6，侵染时间20 min，共培养基添加200μmol/L AS，共培养4 d。荧光检测和PCR试验证实外源目的基因已成功整合到‘京枣39’基因组中，实现了农杆菌介导的‘京枣39’叶片的遗传转化。

关键词

根癌农杆菌 / 遗传转化 / ‘京枣39’ / 叶片 / 抗性筛选