壳聚糖-苯二酚修饰灭活PEDV的口服免疫效果评价

摘要

为评估壳聚糖-苯二酚（chitosan-catechol,Chic）修饰的灭活猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）疫苗的口服免疫效果，通过控制Chic的量制备出由不同质量浓度Chic(0.2、0.4 mg/mL)包裹的灭活PEDV(0.5 mg/mL)，命名为C1+P和C2+P，建立小鼠模型进行免疫试验。采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测小鼠黏膜sIgA和血清IgG、IgG1、IgG2a抗体水平，并通过流式细胞术和CCK-8试验检测脾细胞的分型和增殖活化情况。结果显示，经2次口服免疫后，C2+P组诱导的免疫效果与昂贵的霍乱毒素B亚单位（CTB）佐剂组效果相当；与未经Chic修饰的PEDV组相比，C1+P、C2+P组诱导的鼻黏膜、肺泡、小肠黏膜特异性sIgA的抗体效价分别提高了6.09、6.37倍，5.35、5.65倍和5.64、5.89倍，血清特异性IgG、IgG1、IgG2a分别提高了8.83、9.65倍，13.54、15.07倍和4.27、5.07倍；CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞比例分别提升了1.15、1.17倍和1.11、1.11倍；脾细胞的增殖活化情况也显著增加（P<0.05）。结果表明，口服免疫C1+P和C2+P成功诱导了小鼠体内黏膜免疫和系统性免疫应答效应，显示出Chic作为黏膜免疫佐剂的潜力，表明Chic修饰的灭活PEDV疫苗在有效诱导免疫应答方面具有可行性。

关键词

猪流行性腹泻病毒 / 灭活疫苗 / 黏膜免疫 / 口服免疫 / 佐剂 / 壳聚糖-苯二酚