文献参数: 潘鑫, 周跃辉, 张俊华, 等.青铜峡灌区不同改良措施下盐碱化土壤理化性质及微生物群落的变化特征[J].水土保持通报,2025,45(6):108-120. Citation:Pan Xin, Zhou Yuehui, Zhang Junhua, et al. Variation characteristics of physicochemical properties and microbial communities of saline-alkali soil under different amendment measures in Qingtongxia irrigation area [J]. Bulletin of Soil and Water Conservation,2025,45(6):108-120.
土壤盐碱化是全球性的生态问题,全球范围内约1.00×10
9 hm
2的土地受到盐碱化影响,导致土地退化严重,农业生产力降低,甚至引发粮食安全问题
[1]。中国盐碱地分布广泛,总面积约为3.60×10
7 hm
2,占全国可利用土地面积的5%。其中,大部分盐碱地为荒地,仅约1/5的面积可耕种,同时仍有约1.75×10
7 hm
2土地面临潜在的盐碱化威胁
[2],严重影响中国农业生产、粮食安全和生态文明建设。因此,合理利用盐碱地并降低其盐碱化程度已成为当前研究的热点。
目前,盐碱地的治理措施多种多样。水利措施包括“抽咸换淡”“强排强灌”和“以排水为基础,控盐为根本”等
[3]。传统的物理改良有客土、微区改土、深松土壤、秸秆覆盖、水旱轮作以及上农下渔等
[4]。化学治理措施是向盐碱化土壤中施用外源添加物(磷石膏、腐殖酸、泥炭和醋渣等改良剂)实现盐碱地改良
[5]。此外,微生物也在盐碱地治理中发挥重要作用。与传统耕作方式不同,覆膜滴灌能够在不扰动土层的情况下,提高土壤保水性和水分渗透性并抑制盐分表聚。同时,覆膜处理下微生物丰富度指数与多样性指数均显著高于其他处理
[6],酸杆菌门(Acidobacteriota)和球囊菌门(Glomeromycota)的相对丰度增加
[7]。有机肥的施用不仅能促进作物对养分的吸收、提高土壤肥力,降低土壤的pH值和全盐含量,还能增加土壤含水率并减少化肥的使用
[8-9]。Zhang等
[10]的研究表明,施用有机肥能够提高土壤细菌菌门中放线菌门(Actinobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidota)的相对丰度,并增加真菌菌门中子囊菌门(Ascomycota)的相对丰度。不同耕作措施和施用有机肥都能够提高土壤微生物群落的丰富度和多样性
[11]。
宁夏引黄灌区耕地面积约4.00×10
5 hm
2。据2023年统计,宁夏引黄灌区30%左右的耕地存在不同程度的盐碱化
[12]。宁夏青铜峡灌区依托黄河引水,拥有几千年的农业种植历史。然而,由于自然环境与人为因素的双重影响,该区域普遍存在土壤盐碱化现象。因此,本研究设置了有机无机物料、微生物菌剂的施用以及不同的耕作措施,以探究不同改良措施对灌区盐碱化土壤理化性质和微生物群落的影响,提出能显著增加土壤含水率,降低土壤pH值和全盐含量,提升有机质和养分含量,提高盐碱地土壤微生物群落多样性的最佳农艺措施,为盐碱地资源的高效与可持续利用提供理论依据和技术支撑。
1 材料与方法
1.1 试验区概况
本研究试验地位于宁夏回族自治区吴忠市利通区扁担沟镇一二六部队试验基地(37°49′35″N,106°14′50″E)。该区域属温带半干旱气候地带,平均海拔为1 125 m,年平均气温11.2 ℃,年蒸发量和降水量分别为2 000.0 mm和260.0 mm,降水多集中于7—9月
[13]。该试验基地位于宁夏青铜峡灌区的南部,供试土壤属于中重度盐碱化土壤(
表1)。主要种植玉米。
1.2 试验设计
试验处理包括施用有机无机物料与微生物菌剂和覆膜、深翻等耕作措施,共9个处理(
表2)。选用有机肥、磷石膏和腐殖质类改良物料降低土壤pH和盐分含量,同时提升土壤养分含量,微生物菌剂用于探究微生物在盐碱地改良中的作用。在耕作措施方面,探究覆膜、深翻等对土壤理化性质的影响。其中,T
1为对照(不施改良物料、不深翻和不覆膜),T
2—T
4为施用有机无机物料和微生物菌剂(不深翻和不覆膜),T
5—T
9为不同的耕作措施(不施改良物料)。
正常翻地深度为20 cm,深翻深度为40 cm。T1—T7玉米根部距离滴灌带距离为35 cm, T8和T9玉米根部距离滴灌带距离分别为10 cm和70 cm。随机区组设计,每个处理重复3次,共27个小区,每个小区面积为60 m2。
试验于2024年4月22日播种,2024年9月8日收获,试供玉米品种为强盛199号。播种前全部试验地施用复合肥(0.6 t/hm2),其中氮(N)、磷(P2O5)、钾(K2O)的配比关系为13∶7∶2,所有小区化肥施用量相同。各处理相应化肥、有机肥、磷石膏和天然腐殖质材料等用旋耕机施入0—20 cm土层,深翻处理采用人工翻地。激活液为微生物菌剂,用量为0.9 t/hm2,在玉米拔节期,靠近玉米根部10 cm处开沟深约10 cm,激活液稀释10倍后用喷雾器喷入沟内,然后将土回填。试验地水分管理采用滴灌方式,27个小区每次总灌水量20~30 m3,每个小区每次灌水量保持一致,灌水频率10~15 d 1次。玉米生长期间的病虫草害防治与普通农田相同。
在玉米收获期,从每个小区内随机挑选5株能代表该小区玉米长势的植株,将地表的枯枝落叶等杂物清理干净,用土钻在距玉米植株根部5 cm处按照以下深度采集土壤:0—10,10—20,20—40,40—60,60—80和80—100 cm,共6层。将每个小区相同土层的3钻土混匀,采用四分法留约1 kg土壤装袋,放在有冰袋的保温箱中带回实验室,立即称取适量鲜样进行土壤含水率的测定。随后将一部分土样风干过筛,用于土壤理化指标的测定与分析,另一部分放置于-80 ℃冰箱,用于微生物测定。
1.3 土壤样品理化指标的测定
采用烘干法测定土壤含水率,酸度计法测定pH值(水:土=5∶1),电导率仪测定电导率(水:土=5∶1),土壤全盐通过电导率计算得到。采用重铬酸钾-外加热法测定土壤有机质,凯氏定氮法测定全氮,碱解扩散法测定碱解氮,碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定速效磷,醋酸铵-火焰光度法测定速效钾
[14]。
1.4 土壤DNA样品的提取和高通量测序
利用土壤DNA提取试剂盒(FastDNA® SPIN Kit, QIAGEN, USA)从0.5 g新鲜土样中提取微生物DNA,采用PCR技术扩增细菌16 S rDNA,细菌鉴定区域序列为16 S rDNA基因的V3-V4区,前端引物341 F(5′-CCTAYGGGRBGCASCAG-3′),后端引物806 R(5′-GGACTACNNGGGTATCT AAT-3′)
[15]。采用PCR技术扩增真菌的ITS1-5 F区,前端引物1 737 F(5′-GGAAGTAAAAGTCGT AACAAGG-3′),后端引物2 043 R(5′-GCTGCGT TCTTCATCGATGC-3′)
[1]。扩增后的产物由北京诺禾致源生物科技有限公司通过Illumina Novaseq 6000测序平台完成测序。测序完成后,使用FLASH(Version 1.2.11)对每个样本的reads进行拼接,得到的拼接序列为原始Tags数据,用fastp软件(Version 0.23.1)对拼接得到的原始Tags经过严格的过滤处理,得到高质量的Tags数据,随后对得到的有效数据进行物种注释、丰度变化和多样性等分析。
1.5 数据统计与分析
采用Excel 2021进行数据整理,运用Origin 2024绘制折线图和柱状图,采用SPSS 26.0软件进行方差分析,表中所有数据均为3次重复的平均值±标准差(SD),并采用最小显著差数法(LSD法)进行多重比较(p<0.05)。采用QIIME2(2019.4),R语言和ggplot2包计算细菌真菌的OTU和Alpha多样性指数。PCoA分析使用R语言的WGCNA, stats和ggplot2软件包。此外,采用诺禾云平台进行细菌真菌物种进化树分析,PICRUSt和FunGuild细菌真菌功能预测等分析。
2 结果与分析
2.1 土壤水分的变化特征
由
图1可知,随着土层深度的增加,土壤含水率呈增长趋势,深层(40—100 cm)土壤中各处理差异不显著(
p<0.05,下同)。在施用不同有机无机物料和激活液条件下(T
2—T
4),0—100 cm土层中含水率表现为T
3>T
4>T
2>T
1,T
3与对照显著差异。在不同耕作条件下(T
5—T
9) 0—20 cm土层中,T
5,T
7土壤含水率与对照显著差异,较对照增加18.76%~38.65%,T
9效果最差,较对照降低4.72%~9.64%,深层水分含量各处理差异不显著。与不同物料和激活液处理相比,耕作措施中的覆膜处理对土壤水分影响最显著。
研究结果(
表3)表明,不同处理措施与土层对土壤水分的影响达到极显著水平(
p<0.01),土层深度的
F值均最高,T
2—T
4中不同处理措施对土壤水分的影响比T
5—T
9更显著,在T
5—T
9中不同处理与土层之间具有交互效应。
2.2 土壤pH值及盐分变化特征
由
图2a可知,不同处理(除T
9外)在0—40 cm土层内土壤pH值都呈现降低趋势,各处理中深层土壤的pH值比0—40 cm土层高,且深层土壤中各处理之间差异不显著。不同有机无机物料和激活液添加条件下,T
3处理0—40 cm土层土壤pH值降幅最大,与对照差异显著,较对照降低0.27~0.37。不同耕作措施下,T
5处理效果最佳,T
7次之,T
9的pH值出现增高现象。综合对比,磷石膏+天然腐殖质+硝基腐殖酸对土壤pH值的降低最显著,0—40 cm土层土壤pH值表现为T
3<T
5<T
7<T
2<T
6<T
4<T
8<T
1<T
9。
土壤全盐含量变化特征如
图2b所示。不同有机无机物料和激活液条件下,0—40 cm土层T
3含盐量降幅最显著,较对照降低41.83%~57.55%。不同耕作措施下,0—100 cm土层土壤含盐量T
5和T
7降幅最大,较对照降低27.40%~61.10%。从T
1—T
9的含盐量的变化可以看出,覆膜处理比有机无机物料和激活液处理的效果更显著,T
9处理效果最差。
表4表明,不同处理措施与土层及其交互作用对土壤pH值与含盐量的影响均达到显著水平。土层效应对土壤pH的影响在T
5—T
9中表现更显著,T
2—T
4处理对土壤pH的影响更显著(
F=48.337
**)。处理与土层的交互效应对pH的影响在T
2—T
9中都达到极显著水平。不同处理对土壤含盐量的影响均达到极显著水平;T
5—T
9中土层因素对土壤含盐量的影响高于T
2—T
4。在T
2—T
9中,两者的交互效应对土壤含盐量的调控均具有显著性。
2.3 土壤有机质与土壤养分的变化特征
从
表5和
表6可以看出,耕层(0—20 cm)土壤有机质和养分含量最高,并随土层深度增加而逐渐降低。0—40 cm土层内土壤有机质表现为:T
2>T
3>T
7>T
5>T
4>T
6>T
8>T
1>T
9。其中T
2较对照增加0.37%~20.66%,T
9较对照降低10.22%~14.27%。0—40 cm土层中,T
3处理对土壤碱解氮、速效磷和速效钾含量影响最显著,分别较对照增加90.56%~127.50%,56.19%~115.06%和96.98%~105.86%。T
9效果最差。与对照相比,T
2的土壤有机质和T
3的土壤速效养分增幅最显著,而T
8和T
9处理效果较差。
不同处理与土层(0—40 cm)及其交互效应对土壤有机质及土壤养分的影响如
表7所示。可以看出,无论是不同土层或者不同处理对土壤有机质与土壤养分都有极显著影响,其中施用有机无机物料和激活液对土壤养分的提升显著,两者的交互作用也对土壤养分有影响。
2.4 土壤微生物群落的变化特征
2.4.1 不同处理对盐碱土壤微生物多样性的影响
对不同样本在97%一致性阈值下的Simpson指数、Shannon指数和OTU进行统计分析(
表8)。结果表明,在不同有机无机物料和激活液条件下,T
3对细菌的OTU数和Shannon指数影响显著,Simpson指数在各处理之间无显著差异;T
3对真菌的OTU数、Simpson指数和Shannon指数均有显著影响。不同耕作措施下细菌的OTU数和Shannon指数与对照呈现显著差异,其中T
5,T
7对细菌的OTU数和Shannon指数影响最大,T
9与对照差异不显著;T
5和T
7对真菌的Simpson指数和Shannon指数影响较大,与对照差异显著。
2.4.2 不同处理对盐碱土壤微生物群落组成的影响
高通量测序结果表明,在不同改良措施下细菌门水平上主要细菌群落为变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidota)、芽单胞菌门(Gemmatimonadota)(
图3a)。与对照相比,在有机无机物料添加下,T
2中变形菌门的相对丰度增加11.66%,而芽单胞菌门减少13.09%;T
3中放线菌门和拟杆菌门的相对丰度分别增加9.86%和39.45%,而芽单胞菌门减少12.14%,T
4中放线菌门和酸杆菌门的相对丰度分别增加30.73%和24.06%。在不同耕作措施下,T
5中变形菌门和拟杆菌门的相对丰度较对照分别增加17.19%和50.43%,而芽单胞菌门和绿弯菌门分别减少20.10%和25.35%。
不同处理排名前列的真菌门依次为子囊菌门(Ascomycota)、壶菌门(Chytridiomycota)、担子菌门(Basidiomycota)和罗兹菌门(Rozellomycota)(
图3b)。有机无机物料添加下,T
3中子囊菌门和罗兹菌门的相对丰度较对照分别减少57.60%和47.79%,而担子菌门和Aphelidiomycota分别增加210.09%和331.82%,T
4中壶菌门的相对丰度较对照增加391.69%,而子囊菌门减少32.91%。在不同耕作措施下,T
5中子囊菌门、罗兹菌门和Aphelidiomycota门的相对丰度较对照分别减少20.17%,99.04%和79.68%,而壶菌门增加63.92%。
属水平上,不同处理细菌群落主要是微泡菌属(
Microbulbifer)、假单胞菌属(
Pseudomonas)、泛菌属(
Pantoea)和鞘氨醇单胞菌属(
Sphingomonas)等(
图4a)。T
3中微泡菌属
、泛菌属和
Pontibacter的相对丰度较对照分别增加85.68%,16.71%和82.08%。T
4中假单胞菌属和鞘氨醇单胞菌属的相对丰度与对照相比分别增加28.10%和64.06%,T
5中微泡菌属和假单胞菌属的相对丰度较对照分别增加144.21%和25.52%,而
Subgroup_10的相对丰度减少47.99%。
在不同处理中,主要的真菌属按相对丰度大小依次为
Rhizophydiales_gen_Incertae_sedis,
Helotiales_gen_Incertae_sedis,
Fungi_gen_Incertae_sedis、小菇属(
Mycena)等(
图4b)。与对照相比,T
2中
Rhizophy-diales_gen_Incertae_sedis、柄孢壳属(
Podospora)和
Rozellomycota_gen_Incertae_sedis的相对丰度分别减少17.90%,53.24%和84.16%,
Helotiales_gen_Incertae_sedis和小菇属的相对丰度分别增加327.04%和95.30%。T
3中
Rhizophydiales_gen_Incertae_sedis,
Helotiales_gen_Incertae_sedis、柄孢壳属和
Rozellomycota_gen_Incertae_sedis的相对丰度较对照分别减少69.10%,56.85%,76.06%和47.71%,而
Fungi_gen_Incertae_sedis和小菇属分别增加130.69%和306.01%。T
5中小菇属
、柄孢壳属和
Rozellomycota_gen_Incertae_sedis的相对丰度分别较对照减少70.75%,79.52%和89.09%,而
Helotiales_gen_Incertae_sedis和
Fungi_gen_Incertae_sedis分别较对照增加153.26%和16.84%。
2.4.3 不同处理对盐碱土壤微生物群落物种差异的影响
细菌属水平系统进化树如
图5a所示。最内圈为不同物种的系统发生树,第2圈为OTU的名称,这些名称的背景颜色代表相关物种在所有处理中的平均相对丰度。
从
图5a中可以看出,隶属于变形菌门、放线菌门和拟杆菌门的细菌属占比最大。从丰度环上可以看出,泛菌属
、鞘氨醇单胞菌属
、假单胞菌属
、MND1,
Lysobacter和
Subgroup_10的相对丰度较高,其中T
2中假单胞菌属
、泛菌属的相对丰度高于对照,与对照相比,T
3中霍氏菌属(
Hahella)和T
5中微泡菌属的相对丰度更高。
从真菌属水平系统发生树(
图5b)中可以看出,隶属于子囊菌门、担子菌门和壶菌门的真菌属占比最大。从丰度环上可以看出,
Fungi_gen_Incertae_sedis、小菇属、
Helotiales_gen_Incertae_sedis,
Rhizophydiales_gen_Incertae_sedis和柄孢壳属的相对丰度较高,与对照相比,T
3中小菇属和T
5中
Helotiales_gen_Incertae_sedis的相对丰度更高,这与上述的研究结果相似。
主坐标分析(PCoA)用于研究不同盐碱地之间微生物群落结构的相似性,土壤细菌的PCoA结果显示(
图6a),PC
1与PC
2累积解释46.97%的细菌群落结构差异。T
2在PC
1轴偏离T
1,向正方向延伸,说明有机肥的输入改变了群落组成。T
4在PC
1轴和PC
2轴正向分布,与T
1分布较远,说明T
4与对照的细菌群落差异较大。T
6与T
7均采用深翻40 cm,相较于T
5的正常翻地20 cm, T
6在PC
1轴上分离,T
5的分布与T
6,T
7均存在距离,说明T
5的细菌群落与T
6和T
7差异较大。土壤真菌的PCoA结果显示(
图6b),PC
1和PC
2累积解释33.62%的真菌群落差异。T
2与T
1在PC
1轴附近聚集,说明常规有机肥处理未导致真菌群落结构发生较大改变。T
3与T
1分布分散,表明T
3的真菌群落结构与T
1不同;T
4与T
1分布相对聚集,说明T
4的真菌群落结构与对照差异较小;T
5和T
7分布集中,说明两者群落结构相似。
2.5 土壤微生物功能预测分析
利用PICRUSt(Phylogenetic Investigation of Communities by Reconstruction of Unobserved States)对细菌16 S测序数据基于KEGG数据库进行功能预测,从3个层级进行分类。土壤细菌菌群丰度前10的基因均属于4个第1层级和6个第2层级(图
7a,
7b),其中涉及Metabolism的基因丰度最高(50.66%~52.01%),T
2的Amino Acid Metabolism和Energy Metabolism的基因丰度低于对照,而T
3中Energy Metabolism的基因丰度高于对照,表明T
3中微生物的能量代谢较高。与对照相比,T
7中的Amino Acid Metabolism和Carbohydrate Metabolism的基因丰度更高,表明T
7中微生物可能在进行能量获取和生物合成,其次是与Genetic Information Processing(15.94%~16.25%)和Environmental Information Processing(12.75%~13.77%)相关的基因,如Replication and Repair和Membrane Transport等。在Level 3水平上,土壤菌群中丰度前10的基因和Metabolism相关的涉及Peptidases和Purine metabolism,两者的基因丰度在各处理中差异较小;与Genetic Information Processing相关的基因包括Ribosome和DNA repair and recombination proteins,与对照相比,两者在T
7中的基因丰度更高,这些过程说明微生物的生长繁殖可能较频繁;与Environmental Information Processing相关的基因包括Transporters, ABC transporters和Two component system。 T
2中三者的基因丰度高于对照,T
5中Two component system的基因丰度高于对照,说明T
2和T
5的微生物对环境适应能力较强(
图7c)。
基于真菌物种分类,利用FunGuild对土壤真菌的生态功能进行Guild预测,选取注释结果中丰度信息排名前20的功能信息绘制聚类热图(
图8)。从
图8中可以观察到土壤中各个处理真菌群落功能的差异性。T
2中Animal Pathogen-Endophyte-Plant Pathogen-Wood Saprotroph的丰度与T
1相似;与对照相比,T
4中的Endophyte和Fungal Parasite的丰度更高;T
5中的Plant Pathogen高于其他处理;T
5和T
7中的Ectomycorrhizal高于对照,Ectomycorrhizal为外生菌根真菌,此类真菌为共生营养型。总体上,T
1和T
2土壤中主要以腐生营养型为主,T
4土壤中主要与共生型和寄生型真菌为主,T
5土壤真菌主要与植物致病型相关,T
5和T
7中的Ectomycorrhizal为外生菌根真菌,此类真菌为共生营养型。此外,各个处理中腐生菌群(Saprotroph)的比例显著高于其他类型的生态功能群。
3 讨 论
3.1 不同处理对土壤水、盐及pH值的影响
土壤pH值和全盐含量是导致土壤质量下降的关键因素。在盐碱地环境中,高浓度盐离子不仅降低土壤水势,引起植株生理性缺水,还会因离子毒害而引发细胞膜损伤、代谢紊乱、营养缺乏以及有毒物质的积累;而在高pH值条件下,植物易发生盐碱烧伤,严重时甚至无法生长,从而加剧离子毒害和渗透胁迫效应。本研究通过添加不同的有机无机物料、微生物菌剂和耕作措施,对土壤水盐及pH值进行调控。结果表明,在施用有机无机物料后,土壤的保水性增强,0—40 cm土层内土壤盐分和pH值下降,其中磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸的改良效果最佳,这是由于该处理中磷石膏属于钙质改良剂,能够为土壤提供充足的Ca
2+,置换掉盐碱土中的交换性Na⁺,改善土壤胶体性质,并与HCO
3-,CO
32-离子结合形成CaCO
3沉淀,从而有效降低土壤pH值和全盐含量
[16],该结论与Kim等
[17]研究中脱硫石膏和秸秆堆肥对盐碱土壤pH值和全盐含量降低的结论一致。覆膜能使表层土壤的保水性显著增加,这是由于覆膜通过增强土壤含水率,减少土壤毛细管作用,从而降低盐分因水分蒸发而迁移至表层的可能性,同时实现土壤pH值和盐分含量的降低,与杨赵昱等
[18]利用薄膜处理使膜内0—40 cm土层盐分积累明显减少,有效抑制0—20 cm土层土壤的盐分积累具有相似效果,且能有效保墒抑蒸。
3.2 不同处理对土壤有机质与养分的影响
盐碱化土壤通常盐碱程度高、养分含量低,因此土壤肥力质量提升对盐碱地改良至关重要。有机质含量是衡量土壤肥力的重要指标,也是盐碱化土壤可持续利用的关键保障。有机无机物料通过直接增加或促进营养元素有效化来改善土壤性质,进而提高土壤养分含量
[19]。本研究结果表明,在不同有机无机物料处理下,与对照相比,有机肥和磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸能够显著提高盐碱化土壤的有机质含量(11.39%~20.66%)。
土壤中的碱解氮、速效磷和速效钾是植物可直接吸收的养分。本研究表明,在不同有机无机物料的作用下,土壤耕层的养分显著提高,其中磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸效果最显著。其原因可能在于,磷石膏和硝基腐殖酸的添加为盐碱土壤提供了丰富的多价阳离子Ca
2+和有机质,Ca
2+促进土壤团聚,增强了有机质的保护作用,从而促进有机质的积累
[20]。同时,有机质作为氮、磷等营养元素的重要来源,能够吸附阳离子,增强土壤的保肥能力和缓冲性
[21]。在耕作措施方面,不同处理下土壤养分也得到提升,尤其是覆膜处理,显著提高了土壤耕层的速效养分含量,其原因可能是覆膜降低了NH₃,N₂O, NO, NO₂,PO₄³⁻,K⁺等氮磷钾元素的流失,同时有利于微生物对速效养分的转化与释放
[22]。
3.3 不同处理对土壤微生物的影响
本研究发现,随着有机无机物料和激活液的施用,土壤微生物群落的丰富度和多样性均有所增加,磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸处理细菌和真菌的OTU数、Shannon指数均居首位,这是由于不同的有机无机物料改变土壤环境,进而影响土壤微生物的生存条件和群落结构。研究发现,施用有机肥能够提高根际土壤微生物的群落丰富度和多样性
[23]。Yao等
[24]指出,耕作措施改变了盐碱地微生物的群落结构,本研究也发现翻地深度对微生物群落结构影响较大。土壤真菌的群落丰富度和多样性高于细菌群落,这是因为真菌比细菌对盐分的耐受能力更低,土壤全盐含量下降,使得土壤中真菌对盐度变化的敏感性降低,从而真菌的群落丰富度和多样性均有所提高。
假单胞菌属对多种植物病原菌具有较强的拮抗作用,能促进玉米幼苗的生长
[25];鞘氨醇单胞菌属能分泌表面活性素,促进其他有益菌(如假单胞菌)定殖,降解有机污染物(如多环芳烃、农药),改善土壤环境。微泡菌属可以降解多糖(如琼胶、褐藻胶),促进土壤碳循环和有机质分解,增强根际微生物活性,间接改善养分吸收
[26]。本研究中,磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸处理中微泡菌属与泛菌属以及覆膜处理中微泡菌属
、假单胞菌属和鞘氨醇单胞菌属的丰度增加,说明磷石膏、腐殖质和硝基腐殖酸的施用和覆膜处理可能刺激了这些微生物的生长并促进了它们的增殖。在真菌菌门中,子囊菌门的真菌是广泛分布的土壤有机物分解者。担子菌门真菌可以分解木质纤维素并与植物形成共生关系,特别是菌根真菌,通过菌丝网络提高植物对养分的吸收效率,同时木腐菌通过分解木质素等复杂有机质,增加土壤有机质含量
[27]。本研究发现,磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸的施用,提高了担子菌门的相对丰度,这种变化可能源于土壤中有机物的积累和参与其分解的微生物活性的增强。
3.4 土壤中微生物功能预测分析
对土壤中细菌菌群基因的KEGG pathway注释分析结果表明,预测功能集中为氨基酸代谢、碳水化合物代谢与能量代谢相关的基因,其他还有Membrane Transport和Replication and Repair等。在施用磷石膏、腐殖质和硝基腐殖酸后,与能量代谢相关的基因丰度较对照提高,这可能与细菌分解土壤中的枯枝落叶、动植物残骸和腐殖质等物质来摄取营养有关
[28],覆膜处理中氨基酸代谢、碳水化合物代谢类的基因丰度较高,表明这些化合物的生物转化效率较高。从PICRUSt获得的结果表明,磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸处理和覆膜处理可促进氨基酸代谢、碳水化合物代谢与能量代谢相关的基因的丰富度,对土壤细菌群落有益,但整体上不同处理中细菌的差异不显著,说明土壤细菌代谢功能的空间异质性较小。而真菌的生态功能预测中发现主要的真菌类型为腐生型、共生型与致病型,致病型和腐生型两大营养类型分别通过损害宿主细胞和降解死亡的宿主细胞等有机物质来获取营养。T
1和有机肥处理土壤中存在较多与腐生型和致病型的真菌,腐生真菌群落参与各种有机物的分解,改善土壤肥力,而覆膜处理中共生型真菌的丰度较高,该类型部分真菌的菌丝在植物幼根表面形成致密的鞘状结构,替代根毛功能,扩大吸收面积,向外延伸的菌丝可深入土壤,帮助宿主吸收水分、氮、磷等
[29]。此外,相同功能在不同组间热图颜色的变化说明不同处理的样品虽然具有相同的功能,但是由于不同组样品中所含有的微生物种类和数量不同,也导致了不同处理组之间的差异,反映了土壤真菌功能类群在不同组样品中存在空间异质性。
4 结 论
(1) 磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸能显著降低土壤盐分和pH值,效果最佳。覆膜处理对0—40 cm土层的含水率影响最显著。磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸的施用有助于改善盐碱土壤环境,而覆膜措施则更有利于保持土壤水分,二者均能有效调节土壤水盐,改善土壤环境。
(2) 有机肥显著提升土壤有机质含量,磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸显著促进速效养分释放;覆膜处理显著提高了0—20 cm土层碱解氮、速效磷与速效钾含量,玉米根系距滴灌带70 cm效果最差。
(3) 磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸和覆膜提高了微生物的多样性和丰富度。细菌群落中变形菌门、放线菌门和拟杆菌门及真菌群落中担子菌门、壶菌门的相对丰度增加,而酸杆菌门、绿弯菌门及子囊菌门的相对丰度则降低。
(4) 土壤细菌群落主要参与氨基酸代谢、碳水化合物代谢与能量代谢,但不同处理间细菌功能差异不显著。真菌的功能类群主要为腐生型、共生型与致病型,覆膜处理中共生型真菌的丰度较高,该类真菌有利于玉米的生长发育,同时真菌功能类群在不同处理中具有空间异质性。
(5) 不同改良措施中,磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸能显著降低土壤盐分和pH值,提升土壤地力,而覆膜能增强土壤保水性,防止盐分表聚和养分流失,同时两者对微生物群落多样性影响显著。因而覆膜结合磷石膏+腐殖质+硝基腐殖酸可作为一种农艺措施在青铜峡灌区及同类型地区盐碱地应用。
中国科学院A类战略性先导专项课题“盐碱地限域控盐原理与技术”(XDA0440101)