基于SHH/GLI-1信号通路探讨齐墩果酸抑制结直肠癌小鼠移植瘤生长与炎症反应的作用机制

摘要

目的 基于SHH/GLI-1信号通路探讨齐墩果酸（OA）对结直肠癌小鼠移植瘤生长与炎症反应的影响。方法 选择SPF级6周龄雄性BALB/c裸鼠12只，采用皮下注射HT-29细胞构建结直肠癌移植瘤小鼠模型，随机分为对照组与干预组各6只。干预组按12.5 mg/（kg·d）予腹腔注射OA溶液，对照组按500μL/（kg·d）予腹腔注射生理盐水，给药6 d停止1 d，共干预16 d。干预期间每2 d测量小鼠体质量和肿瘤体积，干预结束后测量肿瘤重量；免疫组化法检测肿瘤组织增殖标志物Ki67、细胞周期相关蛋白[细胞周期素依赖性激酶抑制因子（p21）、周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)]、细胞凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、磷酸化-B淋巴细胞瘤-2死亡拮抗蛋白（p-Bad）、死亡因子（Fas）、死亡因子配体（FasL）]、炎症相关蛋白[环氧化酶-2(COX-2)、一氧化氮合酶（iNOS）]以及SHH/GLI-1信号通路相关蛋白[音猬因子（SHH）、补丁受体（PTCH）、光滑蛋白（SMO）、胶质瘤相关癌基因同源物1(GLI-1)]的表达；TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况；Bio plex检测2组小鼠血清炎症因子白介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果 2组不同时间段体质量比较，差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，干预组干预7、9、11、13、15、17、19 d小鼠肿瘤体积均明显减小（P<0.05），干预后肿瘤重量明显降低（P<0.05）。与对照组比较，干预组肿瘤组织Ki67、CDK4、Cyclin D1、Bcl-2、COX-2、iNOS、SHH、PTCH、SMO、GLI-1和血清IL-1β、IL-6、TNF-α表达均明显降低（P<0.05）,p21、Bax、p-Bad、Fas、FasL表达均明显升高（P<0.05）；凋亡细胞比例明显增加（P<0.05）。结论 OA可以抑制结直肠癌小鼠移植瘤的生长和炎症反应，可能与调控SHH/GLI-1信号通路相关。

关键词

结直肠癌 / 齐墩果酸 / SHH/GLI-1信号通路 / 增殖 / 凋亡 / 炎症