基于Nrf2/HO-1信号通路探究清解扶正颗粒对奥沙利铂导致小鼠肝损伤的疗效及作用机制

摘要

目的 观察清解扶正颗粒（QFG）对奥沙利铂（OXA）诱导的小鼠肝损伤模型的治疗效果，并探究其作用机制。方法 选用18只3～5周龄的健康雄性BALB/c小鼠，按随机数字表法分为对照组、模型（OXA）组和治疗（OXA+QFG）组，每组6只。OXA组和OXA+QFG组按体质量10 mL/kg腹腔注射1 mg/mL OXA溶液，对照组腹腔注射相同剂量无菌生理盐水，3组均为1次/周，连续4周；小鼠造模的同时，OXA+QFG组按体质量8mL/（kg·d）灌胃125 mg/mL QFG溶液，对照组和OXA组均采用同等剂量无菌生理盐水进行灌胃，3组均为1次/d，连续4周。干预后检测3组体质量变化；采用苏木素-伊红（HE）及油红O染色法观察肝脏组织形态及脂滴变化；生化法检测肝脏组织中的丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转移酶（AST）以及血清中的ALT和AST含量变化；流式细胞术检测肝脏活性氧（ROS）含量；RT-qPCR检测核因子-E2相关因子-2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1) mRNA转录水平；Western blot和免疫荧光检测上述蛋白的相对表达量。结果 与对照组比较，OXA组小鼠体质量降低（P<0.05），肝小叶结构损伤，且肝细胞内出现的脂滴增多，肝脏组织MDA、TG、TC和ROS含量均升高（P<0.05）,SOD和CAT含量降低（P<0.05），肝脏组织和血清中的ALT和AST含量均升高（P<0.05）,Nrf2、HO-1 mRNA转录水平及蛋白相对表达量和平均荧光强度降低（P<0.05），而Keap1 mRNA转录水平及蛋白相对表达量和平均荧光强度均升高（P<0.05）；与OXA组比较，OXA+QFG组第2周时体质量降低（P<0.05），而肝脏组织形态损伤有所减轻，脂滴数降低，肝脏组织MDA、TG、TC和ROS含量均降低（P<0.05）,SOD和CAT含量升高（P<0.05），肝脏组织和血清中的ALT和AST含量均降低（P<0.05）,Nrf2、HO-1 mRNA转录水平及蛋白相对表达量和平均荧光强度均升高（P<0.05），而Keap1 mRNA转录水平及蛋白相对表达量和平均荧光强度均降低（P<0.05）。结论 QFG通过提高体内氧化应激水平、激活Nrf2/HO-1信号通路发挥对肝损伤的保护作用从而改善OXA化疗引起的肝损伤。

关键词

肝损伤 / 清解扶正颗粒 / 奥沙利铂 / 氧化应激 / Nrf2/HO-1信号通路