基于miR-34a/STAT3信号通路探讨丹瓜方对高糖高脂诱导的Caco-2细胞糖脂代谢的影响

摘要

目的 基于miR-34a/STAT3信号通路探讨丹瓜方对高糖高脂诱导的Caco-2细胞糖脂代谢的影响。方法 采用随机数字表法将30只雄性SD大鼠分为正常组10只和丹瓜方组20只，丹瓜方组按体质量6.67 mL/（kg·d）给予丹瓜方药液灌胃，正常组按6.67 mL/（kg·d）给予生理盐水灌胃，2组均每日灌胃1次，连续灌胃8 d。麻醉后腹主动脉采血，离心制备正常大鼠血清和丹瓜方含药血清。将传代后的Caco-2细胞培养21 d，分化成小肠上皮细胞，并分为5组。(1)正常对照组：给予含10%正常大鼠血清的低糖培养基培养；(2)模型组：用含10%正常大鼠血清的高脂高糖培养基培养；(3)丹瓜方组：用含10%丹瓜方含药血清的高脂高糖培养基培养；(4) miR-34a沉默组：将miR-34a基因沉默并用高脂高糖培养基培养；(5) miR-34a沉默+丹瓜方组：将miR-34a基因沉默并用含10%丹瓜方含药血清的高脂高糖培养基培养。干预72 h后，分别收集细胞和培养液进行指标检测。qPCR检测细胞信号转导与转录激活因子3(STAT3)、微小核糖核酸-34a(miR-34a)、含DHHC型锌指结构域蛋白19(ZDHHC19) mRNA相对表达水平；检测细胞和培养上清液葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）、游离脂肪酸（FFA）含量。结果 与正常对照组比较，模型组ZDHHC19、STAT3、miR-34a mRNA相对表达水平均明显升高（P<0.05），细胞和培养上清液GLU、TG、FFA含量均明显升高（P<0.05）；与模型组比较，丹瓜方组和miR-34a沉默组ZDHHC19、STAT3、miR-34a mRNA相对表达水平均明显降低（P<0.05），细胞和培养上清液GLU、TG、FFA含量均明显降低（P<0.05）；与miR-34a沉默组比较，miR-34a沉默+丹瓜方组ZDHHC19、STAT3、miR-34a mRNA相对表达水平均明显降低（P<0.05），细胞和培养上清液GLU、TG、FFA含量均明显降低（P<0.05）。结论 丹瓜方可通过调控miR-34a/STAT3信号通路改善高糖高脂培养的Caco-2细胞糖脂代谢紊乱。

关键词

糖尿病 / 糖脂代谢紊乱 / 丹瓜方 / 痰瘀同治