基于PI3K/AKT通路探讨人参皂苷Rd改善HepG2细胞脂质积聚的作用机制

摘要

目的 探讨人参皂苷Rd(G-Rd)对HepG2细胞脂质积聚的影响及作用机制。方法 人肝癌HepG2细胞接种于96孔板中，分别予不同浓度棕榈酸（PA）和G-Rd干预24 h，观察PA和G-Rd对HepG2细胞活性的影响；HepG2细胞接种于96孔板中，分为对照组、PA组和PA+G-Rd不同剂量组（2.5、5、10、20、25、40、50μmol/L），干预24 h，筛选G-Rd干预浓度。HepG2细胞接种于6孔培养板，分为对照组、PA组和G-Rd低、中、高剂量组，观察G-Rd对HepG2细胞的影响。PA组加入0.25 mmol/L PA，低、中、高剂量组同时加入0.25 mmol/L PA和2.5、5、10μmol/L G-Rd，干预24 h。HepG2细胞接种于6孔培养板，分为对照组、PA组、G-Rd组、PI3K抑制剂组、G-Rd+PI3K抑制剂组。PA组加入0.25 mmol/L PA,G-Rd组加入0.25 mmol/L PA+10μmol/L G-Rd,PI3K抑制剂组加入0.25 mmol/L PA+20μmol/L LY294002,G-Rd+PI3K抑制剂组加入0.25 mmol/L PA+10μmol/L G-Rd+20μmol/L LY294002，干预24 h。采用油红O染色观察细胞脂质积聚情况，检测细胞内TG、T-CHO、ALT、AST含量，采用Western blot检测PI3K、P-AKT、AKT、iNOS、COX-2、IL-18、NQO1蛋白相对表达量。结果与对照组比较，PA组HepG2细胞内脂质积聚增加（P<0.05）,TG、T-CHO、ALT、AST含量均升高（P<0.05）,PI3K、P-AKT、NQO1蛋白表达均降低（P<0.05）,iNOS、COX-2、IL-18蛋白表达均升高（P<0.05）；与PA组比较，低、中、高剂量组脂质积聚减少、TG、T-CHO、ALT、AST含量均降低（P<0.05）,PI3K、P-AKT、NQO1蛋白表达均升高（P<0.05）,iNOS、COX-2、IL-18蛋白表达均降低（P<0.05）。加入PI3K抑制剂后，与G-Rd组比较，GRd+PI3K抑制剂组HepG2细胞内脂质积聚增加（P<0.05）,T-CHO、ALT、AST含量均升高（P<0.05）。结论 G-Rd可有效抑制PA诱导的HepG2细胞内脂质积聚，调节脂质表达，保护肝细胞，其机制可能与调控PI3K/AKT通路表达有关。

关键词

非酒精性脂肪肝 / 人参皂苷Rd / 细胞模型 / 棕榈酸 / 脂质代谢 / 炎症