白茶通过抑制氧化应激-炎症级联反应保护阿霉素诱导的斑马鱼心肌损伤

摘要

目的 探讨白茶(WTE)通过抑制氧化应激-炎症级联反应保护阿霉素(Dox)诱导的斑马鱼心肌损伤。方法 分别用不同浓度的WTE干预斑马鱼12、24 h，通过斑马鱼心率、出膜率以及存活率筛选出WTE的最佳干预浓度为0.025、0.05、0.1 mg/mL。待野生型AB系斑马鱼胚胎生长至12 hpf时，分为对照组、Dox组、WTE低浓度组、WTE中浓度组和WTE高浓度组。WTE低、中、高浓度组分别用0.025、0.05、0.1 mg/mL WTE干预12 h，对照组和Dox组使用斑马鱼培养水进行培养；干预结束后，Dox组和WTE低、中、高浓度组用20μg/mL Dox干预24 h，对照组使用斑马鱼培养水进行培养。观察5组心包水肿情况，测量心率和计算心包水肿率；采用中性粒细胞特异性表达绿色荧光的转基因Tg(mpx:EGFP)系斑马鱼胚胎进行干预并统计心脏中性粒细胞数量；DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)活性；比色法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量；qPCR检测核因子相关因子2(nrf2)、溶质载体家族7成员11(slc7a11)、磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶(gpx4a)、前列腺素内过氧化物合酶2(ptgs2a)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acsl4a)mRNA相对表达水平。结果 与对照组比较，Dox组心包水肿率、ROS平均荧光强度和MDA含量均明显升高(P<0.05)，心脏中性粒细胞荧光数量明显增加(P<0.05)，心率和SOD含量均明显降低(P<0.05);nrf2、slc7a11、gpx4a,acsl4a mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),ptgs2a mRNA相对表达水平明显升高(P<0.05)。与Dox组比较，WTE低、中、高浓度组心包水肿率和ROS平均荧光强度均明显降低(P<0.05)，心脏中性粒细胞荧光数量均明显降低(P<0.05)，心率和SOD含量明显升高(P<0.05);WTE低、中浓度组MDA含量均明显降低(P<0.05);WTE低浓度组nrf2、slc7a11、gpx4a、acsl4a mRNA相对表达水平均明显升高(P<0.05),ptgs2a mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05);WTE中浓度组gpx4a、acsl4a mRNA相对表达水平均明显升高(P<0.05),ptgs2a mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05);WTE高浓度组nrf2mRNA相对表达水平明显升高(P<0.05)。结论 WTE通过激活抗氧化应激-炎症级联反应，有效缓解Dox诱导的斑马鱼心肌损伤。

关键词

心肌损伤 / 阿霉素 / 心脏毒性 / 白茶 / 氧化应激 / 炎症反应 / 斑马鱼