肝郁对围绝经期大鼠脑老化的影响及机制研究

摘要

目的 探讨肝郁对围绝经期大鼠脑老化的影响及其内在机制。方法 通过动情周期和糖水偏好实验筛选出应激敏感的13月龄围绝经期SD大鼠14只，按体质量分层采用随机数字表法分为对照组和模型组各7只，模型组大鼠接受为期8周的慢性不可预测温和刺激（CUMS）。造模前后测量大鼠体质量和摄食量；造模后通过糖水偏好实验、强迫游泳实验、旷场实验观察大鼠肝郁情况，新物体识别实验和水迷宫实验观察大鼠认知功能，尼氏染色观察内侧前额叶皮质（mPFC）区病理改变；TUNEL染色检测mPFC区细胞凋亡情况；Western blot检测mPFC组织脑源性神经营养因子（BDNF）和cAMP反应元件结合蛋白（CREB）蛋白表达水平；免疫荧光染色观察mPFC区B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱天冬蛋白酶-3(Caspase-3)、裂解型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达水平。结果 与对照组比较，模型组大鼠体质量、摄食量和糖水偏好率均下降（P<0.05）；强迫游泳实验游泳速度和静止潜伏期下降（P<0.05），静止不动时间延长（P<0.05）；旷场实验水平运动总距离、进入中心区域次数、中心区域停留时间以及中心区域运动距离均下降（P<0.05），新物体识别实验熟悉物体花费时间占比升高（P<0.05），新物体花费时间占比和对新物体的鉴别指数均下降（P<0.05）；水迷宫实验第2、3、4天逃避潜伏期均延长（P<0.05），进入目标象限次数、穿越平台次数、目标象限停留时间均下降（P<0.05）;mPFC区神经元尼氏小体染色较浅且数目减少（P<0.05）;TUNEL阳性细胞增多（P<0.05）;CREB和BDNF蛋白表达水平均降低（P<0.05）;mPFC区Bax、Caspase-3、Cleaved Caspase-3蛋白阳性表达均升高（P<0.05）,Bcl-2蛋白阳性表达降低（P<0.05）。结论 肝郁可能通过调控凋亡相关因子表达，促进mPFC区神经元凋亡，加速脑老化，引起围绝经期大鼠认知功能减退。

关键词

围绝经期 / 肝郁 / 脑老化 / 内侧前额叶皮质 / 认知功能 / 凋亡