补肾壮筋汤对腰椎间盘退变模型大鼠细胞外基质及氧化应激的影响

摘要

目的 观察补肾壮筋汤对腰椎间盘退变模型大鼠细胞外基质及氧化应激的影响。方法 取2月龄雄性SD大鼠60只，随机分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组12只。除对照组外，其余各组采用穿刺法建立大鼠椎间盘退变模型。低、中、高剂量组分别予1.6、3.2、6.4 mL/（kg·d）浓度为0.5 g/mL的补肾壮筋汤水溶液灌胃，对照组和模型组予10 mL/（kg·d）的生理盐水灌胃，1次/d，连续灌胃8周。采用MRI与番红O-固绿染色评估椎间盘退变程度；免疫组化染色法观察椎间盘Ⅰ型胶原蛋白α1链（COL1A1）、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原蛋白α1链（COL2A1）和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)表达水平；采用qPCR检测髓核组织MutT同源蛋白1(MTH1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和超氧化物歧化酶2(SOD2)基因mRNA表达水平；采用Western blot检测髓核组织聚集蛋白聚糖（Aggrecan）、COL2A1、MMP-13、ADAMTS5、MTH1、LDHA和SOD2蛋白表达水平。结果 模型组大鼠椎间盘结构紊乱，髓核呈低信号，椎间盘高度降低，椎间盘明显退变。与模型组比较，不同剂量补肾壮筋汤组大鼠椎间盘结构相对均匀，髓核信号升高，与纤维环界限清晰，椎间盘高度均有所恢复，椎间盘退变均有所减轻。与对照组比较，模型组椎间盘组织COL1A1、MMP-13、ADAMTST5免疫组化阳性表达水平及髓核组织MMP-13、ADAMTS5蛋白表达水平均较高（P<0.05）；椎间盘组织COL2A1免疫组化阳性表达水平，髓核组织MTH1、LDHA mRNA和蛋白表达水平及Aggrecan、COL2A1蛋白表达水平均较低（P<0.05）。与模型组比较，低、中、高剂量组椎间盘组织COL1A1、MMP-13、ADAMTST5免疫组化阳性表达水平均较低（P<0.05）,COL2A1免疫组化阳性表达水平均较高（P<0.05）；中、高剂量组髓核组织MTH1、LDHA、SOD2 mRNA和LDHA、SOD2、COL2A1蛋白表达水平均较高（P<0.05），髓核组织MMP-13和ADAMTST5蛋白表达水平均较低（P<0.05）；高剂量组髓核组织MTH1和Aggrecan蛋白表达水平均较高（P<0.05）。结论 补肾壮筋汤可抑制模型大鼠氧化应激水平，调节ECM代谢，延缓椎间盘退变。

关键词

椎间盘退变 / 补肾壮筋汤 / 氧化应激 / 细胞外基质