基于转录组学探讨升陷汤对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征大鼠舌下神经损伤的保护作用

摘要

目的 基于转录组学探究升陷汤对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）模型大鼠舌下神经损伤的保护作用及其潜在分子机制。方法 将30只雄性SD大鼠按随机数字法分为正常组、模型组和干预组，每组10只。模型组和干预组采用自制低氧动物实验舱建立慢性间歇缺氧（CIH）模型，正常组维持常氧饲养。造模同时，干预组按5 g/（kg·d）给予升陷汤药液灌胃，正常组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃，均连续干预28 d。HE染色法观察3组舌下神经元病理形态变化；采用高通量转录组测序（RNA-seq）技术对3组舌下神经组织进行分析，筛选出差异表达基因，进行基因本体（GO）功能、京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，采用基因集富集分析（GSEA）从基因集水平评估不同分组间的功能差异，并构建蛋白质-蛋白质互作（PPI）网络。结果HE染色结果显示：正常组舌下神经核组织结构完整，神经元数目丰富且排列紧密；模型组舌下神经元数量减少，排列不规则，出现显著变性；干预组神经元数量较模型组明显增加，细胞形态恢复趋于正常，胶质细胞增生减少。转录组分析结果显示：与正常组比较，模型组共筛选出1 978个差异表达基因，其中上调1 056个，下调922个；与模型组比较，干预组共筛选出524个差异表达基因。对共同的差异基因进行统计分析，模型组中524个基因的异常表达状况在升陷汤干预后得以逆转，其中微管蛋白β-2B链（Tubb2b）、配对样同源框2B(Phox2b)等关键基因显著回升。KEGG富集分析结果显示：升陷汤干预后的差异基因主要在跨膜受体蛋白酪氨酸激酶、NOD-like受体及IL-17等信号通路中富集。PPI网络分析结果显示：碳酸酐酶相关蛋白8(CAR8)、肌醇三磷酸受体1(ITPR1)等位于功能网络的核心节点。结论 升陷汤可能通过逆转Tubb2b、Phox2b等特定基因表达，调节CAR8、ITPR1等关键节点蛋白及NOD-like受体、IL-17等炎症免疫通路，从而减轻CIH导致的舌下神经损伤。

关键词

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 / 升陷汤 / 慢性间歇缺氧 / 转录组学