加减补阳还五汤对慢性间歇性低氧脑损伤的神经保护机制

摘要

目的 探讨加减补阳还五汤通过蛋白激酶B1(Akt1)/丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)/Wnt/β-连环蛋白（CTNNB1）信号通路对慢性间歇性低氧所致脑损伤的保护机制。方法 将30只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为常氧组、模型组和中药组，每组10只。常氧组不予任何干预，模型组和中药组采用间歇低氧干预，8 h/d，中药组于每日低氧暴露前后30 min按照13.86 g/kg灌胃加减补阳还五汤，每日2次，共干预18周。通过Y迷宫检测总进臂次数及自发交替反应率；HE染色观察脑组织形态；透射电镜观察脑细胞线粒体超微结构；TUNEL染色法检测海马组织细胞的凋亡情况；ELISA法检测血清丙二醛（MDA）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶（SOD）、白细胞介素-6(IL-6)水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马组织中Akt1、MAPK3、CTNNB1、半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达量。结果 与常氧组比较，模型组自发交替反应率降低（P<0.05），细胞数减少、排列紊乱，伴有炎症细胞浸润及间质水肿，细胞核固缩，线粒体肿胀，嵴断裂及空泡化，TUNEL阳性细胞数量增加（P<0.05），并呈现核固缩、染色质凝聚，TNF-α、MDA和IL-6水平升高（P<0.05）、SOD水平降低（P<0.05）,Akt1、CTNNB1蛋白表达量降低（P<0.05）,Caspase-3蛋白表达量显著升高（P<0.05）；与模型组比较，中药组自发交替反应率显著提高（P<0.05），细胞排列稍乱，但层次增多，未见肿胀及炎症，且线粒体形态规则，空泡化减轻，TUNEL阳性细胞数量减少（P<0.05），细胞核形态基本正常，TNF-α、MDA及IL-6水平均下调（P<0.05），而SOD水平上升（P<0.05）,Caspase-3蛋白表达量显著降低（P<0.05）,Akt1、MAPK3、CTNNB1的蛋白表达量则显著上升（P<0.05）。结论 加减补阳还五汤能够抑制氧化应激与炎症反应，改善大鼠慢性间歇性缺氧所致脑损伤。其机制可能与海马组织中Akt1、MAPK3、CTNNB1蛋白表达量增加以及Caspase-3的蛋白表达量减少有关。

关键词

慢性间歇性低氧 / 脑损伤 / 补阳还五汤 / Akt1/MAPK3/Wnt/CTNNB1信号通路