钙结合蛋白S100A4对脂多糖诱导的胶质瘤细胞U87和U251增殖及迁移的影响

摘要

目的 探讨钙结合蛋白S100A4（S100A4）对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响。方法 体外培养人胶质瘤细胞系U87与U251,通过CRISPR/CAS9 S100A4-sg RNA慢病毒载体敲低S100A4表达(S100A4^low),对照细胞转入空载体Vector-sgRNA慢病毒，实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹实验检测S100A4的敲低效率；将对数生长期细胞，分为空载体（Vector）+磷酸盐缓冲液（PBS）组、S100A4^low+PBS组、Vector+脂多糖（LPS）组和S100A4^low+LPS组，检测细胞Ki-67表达，Transwell、细胞划痕及克隆形成实验评估细胞迁移和克隆形成能力；另设置Vector+PBS组、S100A4^low+PBS组、Vector+LPS组、S100A4^low+LPS组、Vector+LPS+替莫唑胺（TMZ）组和S100A4^low+LPS+TMZ组，采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 与Vector+PBS组相比，S100A4^low+PBS组U251细胞增殖、迁移及克隆形成减少，U87克隆数量下降（P<0.05）;与Vector+LPS组相比，S100A4^low+LPS组2种细胞增殖、迁移能力降低（P<0.05）;与Vector+LPS+TMZ组相比，S100A4^low+LPS+TMZ组2种细胞凋亡率增强（P<0.05）。结论 低表达S100A4可抑制LPS诱导的胶质瘤细胞增殖及迁移功能。

关键词

细胞增殖 / 脂多糖 / 钙结合蛋白S100A4 / 胶质瘤 / 细胞迁移