穿心莲内酯调节CaMKK2/AMPK信号通路抑制缺氧缺血性脑损伤新生大鼠海马神经元凋亡

摘要

目的 探究穿心莲内酯(Andro)调节钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(CaMKK2)/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠海马神经元细胞凋亡的影响。方法 构建HIBD大鼠模型，造模1 h后，将建模成功的大鼠随机分为HIBD组、L-Andro组(腹腔注射50 mg/kg的Andro)、H-Andro组(腹腔注射100 mg/kg的Andro)、H-Andro+STO-609组(腹腔注射100 mg/kg的Andro+10 mg/kg的CaMKK2特异性抑制剂STO-609),每日1次，持续7 d,每组12只；随机选取12只正常大鼠作为Ctrl组，Ctrl组、HIBD组腹腔注射等剂量的生理盐水，酶联免疫吸附试验(ELISE)法检测血清炎症因子和氧化应激水平；苏木精-伊红染色(HE)、尼氏染色(Nissl)染色观察海马组织病理学变化；末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)观察海马神经元细胞凋亡情况；蛋白质印迹法检测海马组织中CaMKK2、p-AMPK、AMPK、Bax、caspase-3、Bcl-2蛋白水平。结果 与Ctrl组相比，HIBD组神经功能评分升高，海马组织损伤显著，炎症及氧化应激指标、凋亡率、促凋亡蛋白(Bax、caspase-3)表达升高，抗炎因子(IL-10)及CaMKK2、p-AMPK/AMPK、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);Andro干预可显著改善上述指标，且高剂量效果更优(P<0.05);STO-609可逆转Andro的保护作用(P<0.05)。结论 Andro改善HIBD大鼠海马神经元细胞凋亡，其机制可能与激活CaMKK2/AMPK信号通路相关。

关键词

穿心莲内酯 / 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2 / 腺苷酸活化蛋白激酶 / 缺氧缺血性脑损伤 / 海马神经元细胞凋亡