miR-218-5p调控SKAP1表达对宫颈癌细胞增殖、迁移和免疫逃逸的影响

摘要

目的 探讨微小核糖核酸-218-5p(miR-218-5p)是否可调控Src激酶相关磷蛋白1(SKAP1)表达从而影响宫颈癌细胞增殖、迁移和免疫逃逸。方法 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测宫颈癌组织和细胞miR-218-5p和SKAP1 mRNA的表达水平；双荧光素酶活性实验验证SKAP1与miR-218-5p的靶向关系；将SiHa细胞分为7组，检测各组细胞中miR-218-5p和SKAP1 mRNA表达水平，细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡水平，以及上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、增殖细胞核抗原(PCNA)、剪切型胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、SKAP1蛋白的表达；将上述各组细胞与NK-92MI细胞共培养，检测NK-92MI细胞免疫杀伤率和共培养细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果 宫颈癌组织和细胞中miR-218-5p表达水平降低，SKAP1 mRNA表达水平升高(P<0.05);过表达miR-218-5p可提高SiHa细胞cleaved caspase-3、E-cadherin蛋白表达，降低N-cadherin、vimentin、PCNA及SKAP1蛋白表达(P<0.05);下调SKAP1表达也可提高SiHa细胞cleaved caspase-3、E-cadherin蛋白表达，降低N-cadherin、vimentin、PCNA及SKAP1蛋白表达(P<0.05);而上调SKAP1表达可逆转过表达miR-218-5p对上述蛋白的调控作用(P<0.05);与miR-218-5p mimics+oe-NC-NK组比较，miR-218-5p mimics+oe-SKAP1-NK组SiHa细胞的免疫杀伤率、TNF-α和IFN-γ水平降低(P<0.05)。结论 miR-218-5p可能通过抑制SKAP1表达来抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和免疫逃逸，促进细胞凋亡。

关键词

微小核糖核酸-218-5p / Src激酶相关磷蛋白1 / 宫颈肿瘤 / 迁移 / 免疫逃逸