小鼠未定带腹侧区GABA能神经元参与慢性痒的形态学研究

摘要

目的:在慢性瘙痒模型上检测小鼠的痒行为和焦虑、抑郁样行为，并观察未定带腹侧区(ZIv)内γ-氨基丁酸(GABA)能神经元的激活情况，为其参与痒觉信息的调控提供形态学证据。方法:应用二苯基环丙烯酮(DCP)在谷氨酸脱羧酶67-绿色荧光蛋白(GAD67-GFP)基因敲入小鼠上建立慢性瘙痒模型，然后运用视频跟踪系统检测痒行为，以验证模型制备是否成功。运用高架十字迷宫实验、悬尾实验检测慢性痒模型小鼠的焦虑、抑郁样行为。利用GAD67-GFP小鼠观察未定带(ZI)各区域内GABA能神经元的分布情况，并结合免疫荧光染色方法分别观察对照组和DCP组小鼠ZIv内GABA能神经元与FOS的双标情况。结果:在GAD67-GFP小鼠的脑切片上可观察到GABA能神经元在未定带各亚区均有分布，且更集中于ZIv。DCP组小鼠抓挠次数显著高于对照组小鼠(P<0.001)。悬尾实验中DCP组小鼠完全不动时间显著高于对照组小鼠，出现抑郁样不动状态。高架十字迷宫实验结果显示DCP组小鼠与对照组相比，进入十字交叉区域的次数和时间占比均明显减少，表现出焦虑样行为。免疫荧光染色结果显示，DCP组小鼠ZIv内FOS阳性细胞数量明显高于对照组，且在该区域观察到大量的FOS与GABA能神经元的共标细胞。结论:小鼠未定带以GABA能神经元分布为主，且更集中于ZIv;慢性痒状态下，ZIv内GABA能神经元激活，为ZIv内GABA能神经元参与慢性痒及其伴发的负性情绪提供了形态学证据。

关键词

未定带 / GABA能神经元 / 痒觉 / 负性情绪 / 小鼠

基金资助

国家科学自然基金(82271243); 陕西省杰青基金(2021JC-32); 军队医学科技青年培育项目(21QNPY065)