枸杞多糖通过增强自噬抑制饥饿诱导的施万细胞凋亡

摘要

目的:探讨枸杞多糖(LBP)抑制施万细胞(SCs)凋亡的作用及相关机制。方法:RSC96细胞饥饿处理12 h制备自噬模型，Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、p62的表达；采用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)试剂盒筛选出LBP作用的最佳浓度。将RSC96细胞随机分为正常组(Control)、饥饿组(Starvation)、Starvation+LBP组，Western Blot或免疫荧光染色检测细胞自噬相关蛋白(LC3、p62)以及髓鞘相关蛋白(p75NTR、PMP22、S100β)的表达；采用Annexin V/PI荧光染色检测细胞的凋亡情况；应用流式细胞术分析细胞周期；Western Blot分析通路蛋白Erk1/2、Akt的磷酸化水平。结果:CCK8结果显示，LBP为300μg/ml时受损RSC96细胞活力最佳。与Control组相比，Starvation组LC3-II/LC3-I水平显著增高(P<0.05)。与Starvation组相比，Starvation+LBP组的凋亡和坏死细胞比例显著降低，处于S期和G2/M期的细胞比例升高；LC3-II、p75NTR、PMP22、S100β蛋白表达量增高，自噬底物蛋白p62的表达量降低；通路蛋白p-Erk1/2表达量增高(P<0.05),而p-Akt蛋白表达量略有下降。结论:LBP可通过增强细胞自噬抑制SCs凋亡，促进髓鞘相关蛋白的表达，其机制与Erk1/2激活和/或Akt抑制有关。

关键词

枸杞多糖 / 施万细胞 / 自噬 / 凋亡 / 大鼠

基金资助

国家自然科学基金(82360258)