Mito-TEMPO通过减轻线粒体损伤抑制铅诱导的BV2小胶质细胞活化

摘要

目的:研究线粒体氧化应激在铅暴露诱导的小胶质细胞活化中的作用，观察靶向线粒体的抗氧化剂Mito-TEMPO的保护作用。方法:培养小鼠小胶质细胞系(BV2),建立铅暴露模型。采用噻唑蓝(MTT)比色法测定铅暴露对细胞活力的影响，采用免疫荧光染色法检测M1型活化标志物CD86蛋白的表达；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量；采用线粒体超氧化物(MitoSOX)染色检测线粒体氧化应激水平；采用线粒体膜电位荧光探针(JC-1)染色检测线粒体膜电位；采用细胞能量代谢分析(O2k)检测线粒体呼吸能力。采用Mito-TEMPO抗氧化剂进行干预，研究Mito-TEMPO对BV2线粒体氧化应激、细胞活化的抑制作用。结果:与对照组相比，铅暴露组BV2细胞CD86蛋白表达水平显著升高，促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平显著升高，线粒体氧化应激水平显著升高，线粒体膜电位、呼吸能力显著降低。Mito-TEMPO处理显著减轻了BV2细胞线粒体氧化应激与功能损伤，并显著抑制了BV2细胞M1型活化水平。结论:Mito-TEMPO能够逆转铅暴露诱导的BV2细胞M1型活化，其机制可能与Mito-TEMPO减轻线粒体氧化应激与功能损伤有关。

关键词

Mito-TEMPO / 铅 / 线粒体 / 炎症 / BV2小胶质细胞