肌肽对血管性认知功能障碍大鼠海马内Akt/mTOR通路及自噬的影响

摘要

目的:观察肌肽(CAR)对血管性认知功能障碍(VCI)大鼠的空间学习记忆能力的影响，并探究Akt/mTOR通路及自噬在其中的作用。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、VCI组及VCI+CAR-L组、VCI+CAR-M组和VCI+CAR-H组。Morris水迷宫实验评测大鼠的空间学习记忆能力；Nissl染色检测海马CA1区细胞损伤的范围和程度；氮蓝四唑法和硫代巴比妥酸法分别检测海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量；Western Blot测定p-Akt、p-mTOR、Beclin-1以及LC3B蛋白表达，同时免疫荧光染色检测CA1区LC3B表达变化。将SH-SY5Y细胞分为对照(Control)组、氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)组、OGD/R+雷帕霉素(RAPA)组、OGD/R+CAR(1.2 mmol/L)组及OGD/R+CAR+RAPA组。噻唑蓝(MTT)检测神经元存活率：Western Blot检测神经元细胞p-mTOR、Beclin-1及LC3B水平，免疫荧光染色检测自噬程度。结果:CAR可改善VCI大鼠学习记忆能力，降低海马组织细胞损伤，抑制氧化应激(P<0.01),提高p-Akt、p-mTOR、p62蛋白的表达(P<0.01或P<0.05),降低Beclin-1的表达和LC3B II/I的比值(P<0.01或P<0.05)。CAR可提高SH-SY5Y各组细胞OGD/R后的存活率(P<0.01),抑制海马神经元的自噬。此外，RAPA的干预抑制了CAR的治疗效果，降低SH-SY5Y各组的存活率(P<0.01),增强了细胞自噬。结论:CAR可改善大鼠VCI损伤，其机制可能通过抑制氧化应激、激活神经细胞中的Akt/mTOR信号通路，进而抑制过度自噬发挥保护作用。

关键词

肌肽 / 血管性认知障碍 / 自噬 / Akt/mTOR信号通路 / 氧化应激 / 大鼠

基金资助

辽宁省教育厅面上项目(2021LJKZ0823)