脂钙素-2及其受体在不同年龄hSOD1^G93A转基因小鼠脊髓内的表达变化

摘要

目的:探讨hSOD1^G93A转基因小鼠疾病进展中，脊髓组织内脂钙素-2（LCN2）及其受体脑型有机阳离子转运蛋白（BOCT）表达的动态改变与肌萎缩侧索硬化症（ALS）疾病进展的关系，为ALS早期抗炎干预治疗提供潜在靶点。方法:本研究选用发病前期、早期、中期、晚期（出生后60、95、108、122 d）hSOD1^G93A转基因小鼠及同窝野生型小鼠（WT小鼠）为动物模型，提取各组模型小鼠脊髓组织，应用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光多重标记检测LCN2、BOCT的表达变化。在BV2细胞中转染pcDNA3.1-G93A-SOD1质粒作为hSOD1^G93ABV2小胶质细胞模型，LPS刺激24 h后使用RT-qPCR和ELISA分别检测细胞中LCN2 mRNA以及培养基中LCN2水平变化；Western blot检测BOCT蛋白表达变化。结果:与同窝同时间点WT小鼠相比，108、122 d hSOD1^G93A转基因小鼠脊髓中LCN2 mRNA表达水平升高；60 d至122 d hSOD1^G93A转基因小鼠脊髓中LCN2和BOCT蛋白表达无显著差异；免疫荧光双重标记结果显示，在95、108和122 d hSOD1^G93A转基因小鼠脊髓前角观察到LCN2及其受体与小胶质细胞标记物Iba-1共标记。在细胞模型中，LPS刺激后，hSOD1^G93ABV2细胞内LCN2 mRNA和蛋白表达升高，细胞培养上清中LCN2含量升高，但细胞内BOCT表达无显著改变。结论:ALS病程中活化的小胶质细胞合成并释放LCN2显著增加，可能参与神经炎症发生和神经元死亡。

关键词

肌萎缩侧索硬化症 / 神经炎症 / 小胶质细胞 / 脂钙素-2 / 小鼠