同型半胱氨酸通过单核细胞趋化蛋白-1加重脑缺血小鼠损伤

摘要

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达诱导巨噬细胞浸润加重急性缺血性卒中(AIS)的机制。方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注小鼠模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑缺血严重程度，HE染色法检测缺血脑组织神经细胞损伤状况和炎症细胞浸润程度；高效液相色谱法检测急性期小鼠脑组织Hcy表达；免疫组织化学染色、Western blot、real time RT-PCR法检测小鼠脑组织MCP-1表达。Transwell小室检测巨噬细胞迁移程度，TUNEL法检测Hcy对内皮细胞影响；利用MCP-1中和抗体观察对巨噬细胞迁移的影响。结果:与假手术组比较，模型组小鼠右侧大脑半球梗死明显，缺血脑组织损伤严重，神经细胞死亡并伴有大量炎症细胞浸润；Hcy水平显著升高，MCP-1蛋白和mRNA表达均明显增加。Hcy刺激小鼠脑血管内皮细胞后可诱导NF-κB(p65)入核，促进巨噬细胞迁移，促进内皮细胞凋亡，给予NF-κB(p65)抑制剂后MCP-1生成减少；MCP-1中和抗体明显抑制巨噬细胞迁移。结论:Hcy、MCP-1与脑缺血再灌注炎性反应相关，且Hcy可能通过NF-κB通路促进MCP-1表达，发挥诱导巨噬细胞浸润作用，加重脑缺血损伤。

关键词

同型半胱氨酸 / 急性缺血性卒中 / 单核细胞趋化蛋白-1 / NF-κB / 小鼠