自噬减少癫痫大鼠海马的谷胱甘肽含量并促进神经元铜死亡

摘要

目的:研究自噬对癫痫大鼠海马谷胱甘肽（GSH）含量及神经元铜死亡的影响。方法:应用戊四氮（PTZ）诱导慢性癫痫大鼠模型。60只SD大鼠随机分为正常组、PTZ组、雷帕霉素（RAPA）干预组、氯喹（CQ）干预组、四硫钼酸盐（TTM）干预组。记录大鼠的癫痫发作级别、潜伏期和发作次数；脑电图检测大鼠脑异常放电；膜片钳测量大鼠海马神经元动作电位；试剂盒检测大鼠海马区GSH、亚铜离子（Cu⁺）含量；尼氏染色观察海马区神经元损伤情况；免疫组织化学染色和Western blot分析海马区微管相关蛋白1轻链3（LC3）、选择性自噬受体蛋白（p62）、二氢脂酰胺S-乙酰转移酶（DLAT）的表达以及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值变化。结果:与正常组比较，PTZ组完全被点燃，建模成功；与其他癫痫组相比较，RAPA组癫痫发作等级及神经元兴奋性升高，尼氏体减少，细胞器损伤加重，Cu⁺水平升高，GSH水平降低，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高、DLAT表达增加；CQ组癫痫发作等级及神经元兴奋性降低，尼氏体含量增加，细胞器损伤减轻（P<0.05）;TTM组发作等级、神经元兴奋性及神经元损伤介于CQ组与PTZ组之间（P<0.05）。结论:慢性癫痫大鼠海马区存在铜死亡，自噬可减少大鼠海马谷胱甘肽含量并促进神经元铜死亡以加重慢性癫痫的发生发展。

关键词

癫痫 / 铜死亡 / 亚铜离子 / 微管相关蛋白1轻链3 / 选择性自噬受体蛋白 / 二氢脂酰胺S-乙酰转移酶 / 大鼠