miR-181a及其靶基因caprin-1在SOD1^G93A转基因小鼠脊髓中的表达

摘要

目的:研究miR-181a及其靶基因细胞质激活/增殖相关蛋白-1（caprin-1）随时间在SOD1^G93A转基因小鼠脊髓中的表达变化。方法:选用24只生后95、108和122 d的SOD1^G93A转基因小鼠作为研究对象，并使用同窝野生型（WT）小鼠作为对照。通过RT-qPCR技术检测脊髓中miR-181a、caprin-1的表达变化；双荧光素酶实验验证miR-181a与caprin-1基因的结合。Western blot技术检测caprin-1蛋白水平表达变化；免疫荧光染色、免疫组化染色探究caprin-1在脊髓中的定位。结果:在95、108和122 d的SOD1^G93A转基因小鼠脊髓中，miR-181a的表达水平较WT小鼠显著升高。双荧光素酶实验验证caprin-1是miR-181a的靶基因。与WT小鼠比较，SOD1^G93A转基因小鼠脊髓中，caprin-1 mRNA表达无明显变化，蛋白表达水平显著下降。免疫荧光染色、免疫组化染色结合尼氏染色显示，caprin-1在脊髓神经元胞体和树突中表达。结论:随着病情进展，SOD1^G93A转基因小鼠脊髓中miR-181a表达升高，通过抑制其靶基因caprin-1翻译，参与ALS发病过程。

关键词

肌萎缩侧索硬化症 / miR-181a / 细胞质激活/增殖相关蛋白-1 / 树突 / RNA结合蛋白 / SOD1^G93A转基因小鼠