Hepatology|小鼠肝细胞限制HBV感染的分子机制

摘要

<正>2023年4月，病毒学国家重点实验室/武汉大学泰康医学院（基础医学院）医学病毒学研究所夏宇尘教授团队系统性地探究了HBV在小鼠肝细胞中的感染过程。在实验方法上，该研究构建了多种稳定表达人源牛磺胆酸钠共转移多肽（hNTCP）的人及小鼠肝细胞，并进行了HBV及其卫星病毒HDV的感染；体外合成了HBV前基因组RNA(pgRNA)、共价闭合环状DNA(cccDNA)及不同形式的松弛环状不完全双链DNA(rcDNA)修复中间体；采用DNA体外修复体系及小鼠高压尾静脉注射模型探究了rcDNA修复形成cccDNA的能力；通过Southern blotting及原位杂交技术对感染过程中HBV DNA的形式及定位进行了检测。实验结果表明，HDV可以在表达hNTCP的小鼠肝细胞中建立感染，而HBV不能；pgRNA转染人肝细胞可以建立HBV感染，转染小鼠肝细胞则不能；HBV复制型质粒、cccDNA及重组cccDNA可以在小鼠肝细胞中进行转录；小鼠肝细胞支持不同形式的rcDNA修复中间体修复形成cccDNA;rcDNA可以被转运至小鼠肝细胞核；核酸酶敏感实验中小鼠肝细胞质中的蛋白结合rcDNA表现出完全的耐受性，这与在人肝细胞中有明显差异。综上，该研究进一步揭示了小鼠肝细胞质中核衣壳的解离是限制HBV感染的一个重要原因，为建立支持HBV