基质金属蛋白酶7在肝癌细胞迁移及免疫细胞浸润中的作用与预后价值

摘要

目的 评估基质金属蛋白酶7(MMP7)在肝癌细胞迁移及免疫细胞浸润中的作用及预后价值。方法 分别构建下调或上调靶基因MMP7的MMP7＿siRNA、pMMP7转染肝癌细胞株（MHCC97H）。采用RT-qPCR、Western Blot分别检测细胞中靶基因mRNA及蛋白的表达水平。扫描电镜和Transwell小室实验分别观察细胞伪足和迁移能力的变化，并采用生物信息学的方法，在TCGA、TIMER数据库分析MMP7与免疫细胞及肝癌患者免疫浸润评分之间的相关性，并进一步研究MMP7与肝癌患者预后的相关性。相关性分析采用Spearman方法。Sanger Box在线工具评估MMP7在肝癌总体生存期、疾病特异性生存期方面的意义。Kaplan-Meier法绘制生存曲线，Log-rank检验评估不同组样本之间的预后差异。结果 构建的MMP7＿siRNA、pMMP7转染MHCC97H细胞后均能有效下调或上调靶基因MMP7的表达，在MHCC97H细胞中MMP7被干扰后细胞伪足明显减少，并且变短，但是过表达MMP7之后细胞表面丝状伪足数量明显增多，并且伪足长度变长，放射状排列。Transwell小室结果发现，MMP7＿siRNA2能够显著降低细胞迁移能力（P<0.05），而转染pMMP7后，细胞迁移能力显著增加（P<0.05）。MMP7的表达与B淋巴细胞（r=0.37）、CD4+T淋巴细胞（r=0.40）、中性粒细胞（r=0.49）、巨噬细胞（r=0.49）、树突状细胞（r=0.47）显著相关（P值均<0.05）。在TCGA数据库中，基于总体生存期最佳截断值将肝癌患者分成MMP7高表达组（n=267）和MMP7低表达组（n=146），结果发现，MMP7高表达组的总体生存期明显低于MMP7低表达组（P<0.05）；基于疾病特异性生存期最佳截断值将肝癌患者分成MMP7高表达组（n=257）和MMP7低表达组（n=145），结果发现，MMP7高表达组的疾病特异性生存期也低于MMP7低表达组（P<0.05）。结论 MMP7促进了肝癌细胞的迁移，并在免疫细胞浸润中发挥主要作用，MMP7的表达也与肝癌的预后具有明显相关性。

关键词

肝肿瘤 / 基质金属蛋白酶7 / 细胞运动