邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）诱发小鼠胆汁淤积和肝损伤的作用机制

摘要

目的 探讨邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）诱发小鼠胆汁淤积和肝损伤机制研究。方法 体内实验：将成年雌性ICR小鼠随机分为对照组（玉米油）、DEHP组（200 mg·kg-1·d-1），共灌胃4周，建立胆汁淤积模型。收集所有小鼠血液与肝组织，生化仪检测血清、肝脏总胆汁酸（TBA）水平，酶标仪检测ALP、GGT;HE染色观察肝组织病理变化；实时定量PCR检测肝脏炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平；液相色谱-三重四级杆质谱仪（LC-MS/MS）检测小鼠肝脏胆汁酸谱。体外实验：培养小鼠肝细胞AML-12，使用DEHP(250μmol/L)以及去氧胆酸（DCA）(125μmol/L)和鹅去氧胆酸（CDCA）(125μmol/L)处理细胞24 h，实时定量PCR检测细胞炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA水平。计量资料两组间比较采用成组t检验，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 体内实验显示：与对照组相比，DEHP组小鼠肝体比，血清TBA、ALP、GGT及肝脏TBA均显著升高（t值分别为-4.396、-5.109、-8.504、-3.792和-7.974,P值均<0.05）。与对照组相比，肝脏胆汁酸谱中胆酸（CA）、CDCA、牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）、DCA及熊去氧胆酸（UDCA）均显著升高（t值分别为-2.802、-3.177、-2.633、-2.874和-2.311,P值均<0.05）。DEHP组小鼠肝脏HE染色显示为汇管区扩大、胆管变形、胆管周围伴有炎性细胞浸润，且肝脏炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA水平均显著升高（t值分别为-2.539、-2.823和-4.636,P值均<0.05）。体外实验显示：0～1 000μmol/L DEHP处理后肝细胞活力实际数值相差不超过15%，分别使用125、250以及500μmol/L的DEHP刺激后，肝细胞的炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA水平均明显升高（P值均<0.05）。与单独使用DEHP刺激相比，CDCA联合DEHP刺激上调了细胞炎症因子IL-1β mRNA水平（P<0.01）;DCA与DEHP联合刺激可显著增加细胞炎症因子IL-1β和IL-6的mRNA水平（P值均<0.01）。结论 DEHP暴露导致小鼠胆汁淤积肝病的发生并诱发肝脏炎症，这可能与其促进有毒胆汁酸的产生进而加剧炎性因子分泌有关。

关键词

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 / 环境污染物 / 胆汁淤积 / 胆汁酸类

基金资助

国家自然科学基金（82073566）; 安徽省高校优秀青年人才支持计划资助项目（gxyq2019014）; 临床药学与药理学共建项目（2020）; 安徽省公共卫生临床中心安徽医科大学第一附属医院北区科研培育基金资助项目（2023YKJ14,2023YKJ06,2023YKJ11）