扶正化瘀方对肝硬化小鼠模型肝细胞消亡与再生的影响

摘要

目的 探讨扶正化瘀方对纤维化肝脏肝细胞消亡与再生的影响，及其药物促进肝细胞再生的作用机制。方法 以CCl4腹腔注射6周诱导建立肝硬化小鼠模型。正常对照组9只，模型组10只，索拉非尼组10只，扶正化瘀方组10只。自造模第4周起，扶正化瘀方组、索拉非尼组分别给予4.8 g/kg、4 mg/kg小鼠体质量相应药物灌胃，连续3周；正常组和模型组给予等体积羧甲基纤维素钠。检测血清肝功能；METAVIR评分系统评价肝组织炎症及纤维化分期；天狼星红染色和肝组织羟脯氨酸含量评价胶原沉积量；免疫组化检测Ⅳ型胶原、CD31与CD32b、Ki67、Cyclin D1、谷氨酰胺合成酶（GS）、Wnt2以及HGF蛋白的表达；Western Blot检测肝组织Wnt2、LRP6、β-catenin、p-β-catenin、Cyclin D1表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与模型组比较，扶正化瘀方组和索拉非尼组血清ALT、AST水平和肝组织羟脯氨酸含量均降低（P值均<0.01）,METAVIR评分减低（P值均<0.05）；Ⅳ型胶原、CD31表达减少（P值均<0.05）,CD32b表达增加（P<0.01）；肝组织实质病变消亡数量减少，Ki67、Cyclin D1表达上升（P值均<0.01）;Wnt2、LRP6、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达水平上调、p-β-catenin表达显著下调（P值均<0.05）；肝组织CD32b与Wnt2共染阳性细胞显著增多。结论 扶正化瘀方可通过抑制肝窦毛细血管化，改善肝窦内皮细胞Wnt2外分泌功能，激活肝细胞再生相关Wnt/β-catenin信号通路，最终逆转肝硬化。

关键词

肝硬化 / 肝再生 / 扶正化瘀方

基金资助

国家自然科学基金面上项目（82274305）