人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）对肝纤维化小鼠模型的治疗作用及其机制分析

摘要

目的 探讨人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）对肝纤维化小鼠的治疗作用及其机制。方法 选取18只SPF级6周龄C57BL/6小鼠，使用随机数字表法随机分为3组，分别为对照组、CCl_4模型组（CCl_4组）和h UC-MSC治疗组（MSC组），每组6只。CCl_4组和MSC组腹腔注射CCl_4溶液构建小鼠肝纤维化模型，对照组同时注射相同剂量玉米油，MSC组在注射CCl_4的过程经尾静脉注射hUC-MSC。于第8周末采取小鼠血清，处死小鼠，取小鼠肝脏固定。使用酶联免疫吸附法测定炎症因子水平，自动生化检测仪检测肝功能相关指标，HE染色、Masson染色、天狼星红染色及α-SMA免疫荧光用于评估肝纤维化情况；TGF-β刺激的肝星状细胞（HSC）分别在有无几丁质酶3样蛋白1(CHI3L1)添加的培养基中与hUC-MSC共培养，Western Blot试验检测蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Dunnett-t检验。结果 Masson染色、天狼星红染色提示CCl_4组小鼠纤维化较对照组明显（P值均<0.05）,MSC组小鼠纤维化较CCl_4组减轻（P值均<0.05）。CCl_4组IL-1β、IL-6、AST、ALT和ALP水平较对照组明显升高（P值均<0.05）,MSC组IL-6、AST、ALT及ALP水平较CCl_4组明显降低（P值均<0.05）。CCl_4组CHI3L1和α-SMA的表达均高于对照组和MSC组（P值均<0.05）。细胞培养实验显示，MSC+HSC组Bax表达高于HSC组和MSC+CHI3L1组（P值均<0.05），提示CHI3L1逆转了MSC对活化的HSC的促凋亡作用。结论 hUC-MSC治疗可以改善小鼠肝纤维化，其作用机制可能与抑制CHI3L1从而促进HSC的凋亡相关。

关键词

肝纤维化 / 间充质干细胞 / 壳多糖酶3样蛋白质1 / 小鼠,近交C57BL

基金资助

武汉大学教育发展基金会-抗衰老研究中心专款（2002330）; 中央高校基本科研业务费专项资金（2042022kf1115）