猪去氧胆酸对脂肪变性肝细胞活性的影响及其机制

摘要

目的 探讨猪去氧胆酸（HDCA）在代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）发展中的作用及机制，为进一步阐明MAFLD的发病机制提供新的理论依据。方法 L02肝细胞作为实验细胞，利用棕榈酸诱导L02细胞发生脂肪变性。采用FXR siRNA干扰链技术，构建FXR低表达的肝细胞株。CCK8实验检测HDCA在不同浓度（0、100、200、300、400μmol/L）和时间（12、24、36、48 h）对L02脂肪变性肝细胞的影响。通过qRT-PCR检测法尼醇X受体（FXR）、增殖细胞核抗原（PCNA）、周期蛋白D1(Cyclin D1)、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）和蛋白激酶B(AKT)mRNA表达；Western Blot检测FXR、Cyclin D1、PCNA、PI3K、pPI3K、AKT和p-AKT蛋白表达。计量资料服从正态分布且方差齐时多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Tukey HSD检验；服从正态分布但方差不齐时采用Welch方差分析，进一步两两比较采用Games-Howell检验。两组间比较采用成组t检验。结果 CCK8检测结果显示，300μmol/L HDCA处理的L02细胞和脂肪变性肝细胞活性明显下降（P值均<0.05）;qRT-PCR检测结果显示，FXR mRNA表达增强，PCNA、Cyclin D1、PI3K、AKT的mRNA表达下降，差异均有统计学意义（P值均<0.05）。Western Blot检测结果显示，FXR蛋白表达明显上升（P<0.05）；干扰L02细胞FXR的表达后，PCNA、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT的蛋白表达均明显增加（P值均<0.05）。结论 HDCA通过上调FXR表达抑制PI3K/AKT信号通路，从而造成脂肪变性肝细胞活性下降。

关键词

代谢相关脂肪性肝病 / 猪去氧胆酸 / 法尼醇X受体

基金资助

湖南省教育厅一般项目（20C1586）; 湖南省科技创新计划项目（2020SK51910,2021SK51902）