没食子酸对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其机制

摘要

目的 观察没食子酸（GA）对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法 用不同浓度GA（0、5、10、20、30、40、50μg/mL）处理肝癌HepG2细胞24 h和48 h后，CCK-8法检测细胞活性并计算IC₅₀值；实验分为对照组（HepG2细胞）、5μg/mL GA组、10μg/mL GA组、20μg/mL GA组，平板克隆形成实验检测GA对细胞增殖能力的影响，细胞划痕和Transwell小室侵袭实验检测GA对细胞迁移和侵袭能力的影响，流式细胞仪检测GA对细胞凋亡的影响；Western Blot检测基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9和凋亡相关蛋白表达情况。多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 GA作用HepG2细胞24 h和48 h的IC50值为（38.02±2.58）μg/mL和（18.36±1.54）μg/mL。对照组、5μg/mL GA组、10μg/mL GA组、20μg/mL GA组的细胞克隆形成数分别为（239.00±29.45）个、（210.00±19.00）个、（144.33±16.03）个、（57.00±9.55）个，与对照组比较，各实验组细胞克隆形成能力均明显下降（P值均<0.05）。处理24 h后，各组细胞的迁移率分别为42.62%±7.82%、35.34%±6.42%、21.85%±4.42%、12.57%±3.54%，穿膜细胞数目分别为（230.30±15.30）个、（182.12±12.60）个、（137.20±7.50）个、（124.40±6.80）个，与对照组比较，各实验组细胞的相对迁移率和穿膜细胞数均明显下降（P值均<0.05）。处理48 h后，各组细胞凋亡率分别为0.67%±0.08%、13.27%±1.07%、20.94%±2.45%、40.74%±2.63%，与对照组比较，各实验组细胞凋亡率均明显升高（P值均<0.05）。与对照组比较，各实验组细胞MMP-2、MMP-9表达水平均明显降低（P值均<0.05）,Bcl-2关联X蛋白（Bax）、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved caspase-3）蛋白表达水平均明显升高（P值均<0.05）。结论 GA可抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭，促进其凋亡，作用机制可能与调控Bax/Bcl-2以及迁移相关蛋白MMP-2、MMP-9有关。

关键词

没食子酸 / 肝肿瘤,实验性 / 细胞增殖 / 细胞运动 / 细胞凋亡

基金资助

吉林省卫生与健康技术创新项目（2020J082）