咖啡酸在重症急性胰腺炎小鼠模型中的作用及其机制

摘要

目的 研究咖啡酸（CA）对雨蛙素联合脂多糖诱导的重症急性胰腺炎的影响及潜在机制，以期为重症急性胰腺炎治疗提供潜在新型药物的研究基础。方法 将6周龄C57BL/6J小鼠分为4组：对照组、模型组、CA组及醋酸奥曲肽（OA）组，每组6只。除对照组注射生理盐水外，其余各组通过腹腔注射雨蛙素联合脂多糖构建重症急性胰腺炎小鼠模型，在初次注射雨蛙素1 h后，CA组及OA组小鼠分别给予CA腹腔注射或OA皮下注射3次，每次间隔8 h。造模24 h后观察小鼠一般情况，收集血清和胰腺、肺、结肠组织。通过HE染色观察胰腺、肺组织病理变化。检测小鼠血清α-淀粉酶、脂肪酶、TNF-α、IL-6、ALT、AST和Cr水平。RT-PCR检测胰腺、肺组织促炎因子表达，通过髓过氧化物酶（MPO）免疫组化观察中性粒细胞浸润程度，Western Blot检测胰腺和肺组织核因子-κB(NF-κB)活化，中性粒细胞胞外陷阱（NET）形成标志物瓜氨酸化组蛋白H3(Cit H3)水平，以及结肠组织ZO-1表达水平。计量资料多组间数据比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用Dunnett’s t检验。结果 与对照组比较，模型组小鼠胰腺及肺组织损伤严重，血清α-淀粉酶、脂肪酶活性，以及血清、肺组织中促炎因子IL-6、IL-1β和TNF-α水平均显著升高（P值均<0.05），胰腺及肺组织中NF-κB活化、中性粒细胞浸润及NET形成均显著增加（P值均<0.05）。与模型组相比，CA组小鼠胰腺及肺组织病理损伤减轻，血清α-淀粉酶活性以及血清、肺组织中促炎因子IL-6、IL-1β和TNF-α水平均下调（P值均<0.05），胰腺及肺组织NF-κB活化、中性粒细胞浸润及NET形成均减少（P值均<0.05）。结论 CA可减轻雨蛙素联合脂多糖诱导的SAP小鼠模型的症状，抑制中性粒细胞募集及NET形成可能是其部分作用机制。

关键词

胰腺炎 / 小鼠,近交C57BL / 咖啡酸 / 模型,动物

基金资助

上海市卫生健康委卫生行业临床研究专项（202040223）