同源盒基因A6(HOXA6)调控肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、转移和凋亡的作用机制

摘要

目的 研究同源盒基因A6(HOXA6)对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、转移和凋亡的影响，以及与PI3K/AKT信号通路的关系。方法 培养肝癌HepG2细胞，构建HOXA6过表达质粒和干扰siRNA并转染细胞，随机分成4组：空白质粒组、HOXA6过表达组、siRNA阴性对照组和siRNA HOXA6干扰组。采用CCK-8法检测细胞增殖，Transwell法检测细胞侵袭，划痕愈合实验检测细胞迁移（相关蛋白TIMP3、MMP9和MMP3），流式细胞仪检测HepG2肝癌细胞凋亡（相关蛋白BAX和BCL2）,BCA法测定蛋白质浓度，Western Blot检测蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 与空白质粒组比，HOXA6过表达显著促进了肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移（P值均<0.001）;TIMP3蛋白表达水平显著下降（P<0.001），而MMP9和MMP3表达水平均显著升高（P值均<0.001）。与siRNA阴性对照组比，干扰HOXA6表达显著抑制了肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移（P值均<0.001）;TIMP3蛋白表达水平显著升高（P<0.001）,MMP9和MMP3表达均显著下降（P值均<0.001）。流式细胞仪检测结果显示，与空白质粒组比，HOXA6过表达抑制了肝癌HepG2细胞的凋亡（P<0.001）；凋亡相关蛋白BAX表达下降而BCL2表达升高（P值均<0.001）。与siRNA阴性对照组相比，干扰HOXA6表达则促进了肝癌HepG2细胞的凋亡（P<0.001）;BAX表达升高而BCL2表达下降（P值均<0.001）。HOXA6过表达组p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K均显著高于空白质粒组（P值均<0.001）,siRNA HOXA6干扰组p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K均显著低于siRNA阴性对照组（P值均<0.001）。结论 HOXA6通过磷酸化激活PI3K/AKT信号通路促进HepG2肝癌细胞增殖、侵袭和转移，抑制肝癌细胞凋亡。

关键词

Hep G2细胞 / 基因,同源盒 / 细胞增殖 / 细胞凋亡

基金资助

国家自然科学基金面上项目（82374189,81774098）