一贯煎对M1型骨髓巨噬细胞治疗肝硬化大鼠模型效果的影响及其机制分析

摘要

目的 观察一贯煎对M1型骨髓巨噬细胞（M1-BMDM）治疗2-AAF/CCl₄诱导的大鼠肝硬化作用的影响与机制。方法 分离BMDM，脂多糖诱导分化为M1-BMDM。雄性Wistar大鼠随机分为正常组（n=5）和造模组（n=45）。造模组大鼠予以50%CCl₄每周2次皮下注射。第7周开始，将造模大鼠随机分为模型组（M组）、一贯煎组（YGJD组）、M1-BMDM组、M1-BMDM+YGJD组、索拉非尼组（SORA组），改用30%CCl₄皮下注射以维持肝硬化进展，同时以2-AAF灌胃，且饮水中加入CCR2抑制剂，分组干预，9周末取材。观察血清肝功能、肝组织病理、肝组织羟脯氨酸（Hyp）含量、肝星状细胞活化、肝纤维化及炎症相关因子、Wnt信号通路相关分子表达水平等。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与M组比较，M1-BMDM+YGJD组大鼠血清ALT、AST、TBil水平均明显降低（P值均<0.05）,Alb含量显著增加（P<0.05）；与M1-BMDM组比较，M1-BMDM+YGJD组血清TBil含量显著降低（P<0.05）、Alb含量显著升高（P<0.05）。与M1-BMDM组比较，M1-BMDM+YGJD组CD68、TNF-α表达显著降低（P<0.05）。与M1-BMDM组比较，M1-BMDM+YGJD组Hyp含量及天狼星红胶原阳性染色面积均显著降低（P值均<0.05）。M1-BMDM+YGJD组非经典Wnt信号通路分子Wnt5a mRNA和蛋白表达均显著低于M1-BMDM组（P值均<0.05）,Fzd2 mRNA表达水平显著低于M1-BMDM组（P<0.05），且Wnt4、Wnt5b和Fzd3 mRNA表达水平亦显著降低（P值均<0.05），而经典Wnt信号通路分子β-catenin、LRP5、LRP6、Fzd5和TCF mRNA表达水平均无明显改变。结论 一贯煎可提高M1-BMDM对2-AAF/CCl₄诱导的大鼠肝硬化的治疗效应，其机制可能与抑制非经典Wnt5a/Fzd2信号通路有关，为中医药协同M1-BMDM治疗肝硬化提供了新思路。

关键词

肝硬化 / 巨噬细胞 / 一贯煎 / Wnt信号通路 / 大鼠, Wistar

基金资助

国家自然科学基金面上项目（81874390）; 上海市科委自然科学基金面上项目（21ZR1464100）; 上海市科委2022年度“科技创新行动计划”生物医药科技支撑专项（22S11901700）; 上海市临床重点专科建设项目（shslczdzk01201）