溴酚蓝与牛血清白蛋白的相互作用研究

邹华; 周享春; 孙梅香; 王玉龙

doi:10.16088/j.issn.1001-6600.2014.02.043

广西师范大学学报（自然科学版） ›› 2014, Vol. 32 ›› Issue (02) : 82 -87. DOI: 10.16088/j.issn.1001-6600.2014.02.043

溴酚蓝与牛血清白蛋白的相互作用研究

邹华, 周享春, 孙梅香, 王玉龙

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摘要

在模拟动物体生理条件和不同温度下,采用荧光、紫外光谱法研究溴酚蓝（BPB）与牛血清白蛋白（BSA）结合反应。用Stern-Volmer和Lineweaver-Burk方程分别处理试验数据,发现BSA与BPB发生反应,生成新的复合物,属于静态荧光猝灭。实验求出反应时复合物的形成常数K_LB、热力学参数与结合位点数,证明溴酚蓝与牛血清白蛋白的结合主要为静电作用力。位点竞争实验结果显示BPB与BSA的作用位置主要在BSA的Site I（sub-domainⅡA）位。通过同步荧光光谱和三维荧光光谱法,探讨BPB对BSA构象的影响,实验结果表明BPB使色氨酸残基所处微环境的极性减弱、疏水作用增强。本文为探讨BPB的染色机理、毒理效应和生物学效应提供了重要信息。