植物内生菌透射电镜负染标本制备方法的对比研究

黄远洁; 李卫东; 莫肖敏

doi:10.16088/j.issn.1001-6600.2016.03.018

广西师范大学学报（自然科学版） ›› 2016, Vol. 34 ›› Issue (03) : 127 -130. DOI: 10.16088/j.issn.1001-6600.2016.03.018

植物内生菌透射电镜负染标本制备方法的对比研究

黄远洁, 李卫东, 莫肖敏

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摘要

通过比较4种不同方法处理的植物内生菌负染标本的透射电镜检测结果,探讨植物内生菌透射电镜负染标本的理想制备方法。采用直接刮取法、双蒸水冲洗法、双蒸水冲洗离心重悬法和双蒸水冲洗静置法制备菌悬液,应用10g/L磷钨酸漂浮法负染,透射电子显微镜检测,根据菌的形态特征及菌毛、鞭毛形状数量等指标判断取材及处理方法的各自优缺点。结果显示:直接刮取法的样品原始状态保存较好,但杂质多,背景重;双蒸水冲洗的样品背景较干净;双蒸水冲洗离心重悬法和双蒸水冲洗静置法的样品视野清晰、分布均匀,背景干净、杂质少,但前者菌的形态结构较易受影响。可见,透射电镜是植物内生菌检测的重要工具,需根据实际情况选用样品制备方法。在严格控制静置时长的前提下,双蒸水冲洗静置法制备菌悬液后应用负染技术可获得较理想的检测效果。