基于羧基载体LX-1000IDA的脂肪酶固定化研究

朱衡; 张继福; 张云; 胡云峰

doi:10.16088/j.issn.1001-6600.2020.06.011

广西师范大学学报（自然科学版） ›› 2020, Vol. 38 ›› Issue (06) : 88 -101. DOI: 10.16088/j.issn.1001-6600.2020.06.011

基于羧基载体LX-1000IDA的脂肪酶固定化研究

朱衡, 张继福, 张云, 胡云峰

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摘要

本文利用碳二亚胺EDC作为羧基载体LX-1000IDA的活化剂,通过脂肪酶的表面氨基,将脂肪酶固定于羧基载体上,制成固定化海洋脂肪酶IDA-LIPASE。通过单因素实验、Plackett Burman试验和正交试验,对载体-酶液和交联剂的添加顺序、缓冲液浓度、温度、pH、载体量、时间和碳二亚胺EDC浓度等进行优化和筛选,得到的最佳固定化条件为:pH4.5、载体量0.2 g、时间6 h、温度25℃、EDC质量分数0.6%,制备得到酶活力为114 U/g的固定化酶。对该条件进行了10倍扩大固定化,制备得到的固定化脂肪酶IDA-LIPASE酶活力为210 U/g。对制备的固定化酶酶学性质鉴定表明:固定化酶与游离酶相比,最适反应温度提高10℃,最适反应pH向碱性方向移动0.5,重复使用7次还保留40%左右的酶活,具有优异的热稳定性;固定化酶在4℃保存30 d后保留84.6%酶活。该固定化酶IDA-LIPASE相比于游离酶更能适应工业生产环境,具备实际生产应用的潜力和价值。