裂解多糖单加氧酶纳米花固定化研究

任文文; 孙云泽; 李蓉

doi:10.16088/j.issn.1001-6600.2021032201

广西师范大学学报（自然科学版） ›› 2022, Vol. 40 ›› Issue (02) : 158 -169. DOI: 10.16088/j.issn.1001-6600.2021032201

裂解多糖单加氧酶纳米花固定化研究

任文文, 孙云泽, 李蓉

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摘要

本文利用新型无机晶体复合物磷酸铜作为载体，对裂解多糖单加氧酶cx-LPMO-B进行固定化，研究其固定化过程的最适条件，并对游离酶及固定化酶的酶学性质进行对比。结果显示：在搅拌条件下，向含有裂解多糖单加氧酶pH=7.4 0.01 mol/L的磷酸盐缓冲溶液中滴加硫酸铜，可形成酶-磷酸铜纳米花，即cx-LPMO-B-NF;在25℃、14 h、酶含量为0.3 g/L条件下制备得到的cx-LPMO-B-NF活性最高，固定化酶重复使用6次后仍能保持60%以上的酶活；扫描电子显微镜(SEM)及透射电子显微镜(TEM)发现cx-LPMO-B-NF结构呈现分散均匀且单一的盛开花朵状；固定化酶最适反应pH=4.0,最适反应温度50℃。固定化酶重复使用性显著增强，花状结构增加了其表面积，更加有利于对游离酶的固定化，反应条件较温和使其具有较高的工业化应用前景。