烟云彩螽肠道细菌的分离鉴定及抗菌活性菌株筛选

摘要

采用稀释涂布法对烟云彩螽肠道细菌进行分离纯化，并结合形态学和分子生物学方法对其进行鉴定；同时，采用平板对峙法测定其对植物病原真菌的拮抗活性，进一步以菌丝生长速率法评价活性肠道细菌发酵产物提取物对植物病原真菌的抗菌效果。结果表明，从烟云彩螽肠道中分离获得76株可培养细菌，其中11株细菌经形态学和分子生物学鉴定归为9个不同属，包括亮杆菌属Leucobacter、微杆菌属Microbacterium、纤维微菌属Cellulosimicrobium、节杆菌属Arthrobacter、赖氨酸芽孢杆菌属Lysinibacillus、葡萄球菌属Staphylococcus、大西洋杆菌属Atlantibacter、克雷伯氏菌属Klebsiella、肠杆菌属Enterobacter。通过平板对峙法测定发现，产酸克雷伯氏菌Klebsiella oxytoca BS.X3-A1对9种供试病原菌均具有拮抗活性。进一步测定该菌株发酵产物对9种供试病原菌的抑制活性，当处理浓度为4 g/L时，其对甘蔗凤梨病菌、茶轮斑病菌、贡柑链格孢菌、水稻胡麻叶斑病菌、甘蓝黑斑病菌的抑制率均为100%;对辣椒炭疽病菌、金橘砂皮病菌、玉米大斑病菌的抑制率均超过80%;对烟草黑胫病菌抑制率相对较弱，为54.68%。接着，测定该菌株对9种植物病原真菌菌丝毒力，发现EC₅₀值在0.394 8～3.908 9 g/L。其中，对甘蔗凤梨病菌抑制效果最佳，EC₅₀值为0.394 8 g/L,小于0.5 g/L;其次是茶轮斑病菌和贡柑链格孢菌，EC₅₀值分别为1.132 0和1.326 8 g/L,均小于1.5 g/L。此外，对玉米大斑病菌、水稻胡麻叶斑病菌、金橘砂皮病菌也表现出较好的抗菌活性，EC₅₀值分别为2.225 6、2.226 3、2.327 2 g/L,均小于3 g/L;而对甘蓝黑斑病菌和烟草黑胫病菌的抗菌活性相对较差，EC₅₀值为3.071 8和3.908 9 g/L。综上，烟云彩螽肠道中具有抗植物病原真菌的细菌，其肠道细菌可产生抗植物病原真菌的次生代谢产物。研究结果为后续从烟云彩螽肠道菌中挖掘抗植物病原真菌活性物质提供参考。

关键词

烟云彩螽 / 肠道细菌 / 分离鉴定 / 植物病原真菌 / 抗菌活性