LncRNA NEAT1调控miR-27b-3p/PFKFB3对皮肤鳞状细胞癌细胞生物学行为的影响

摘要

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)核富集转录体1(NEAT1)调控miR-27b-3p/PFKFB3轴对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖及上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法 以皮肤鳞状细胞癌细胞A431及人正常皮肤细胞HFF为对象，qRT-PCR检测LncRNA NEAT1、miR-27b-3p、PFKFB3 mRNA表达；Western blot分析PFKFB3、Cyclin D1及EMT标志蛋白(E-cadherin、Vimentin、N-cadherin)表达；通过克隆形成、划痕实验评估细胞增殖及迁移能力；双荧光素酶实验验证靶向关系。结果 与HFF细胞相比，A431细胞中LncRNA NEAT1和PFKFB3 mRNA表达显著上调，miR-27b-3p表达显著下调(P<0.001)。过表达miR-27b-3p可抑制A431细胞增殖(克隆数目减少)、迁移(划痕愈合率下降)及EMT进程(E-cadherin上调，Cyclin D1、Vimentin、N-cadherin下调，P<0.01)。沉默LncRNA NEAT1后，miR-27b-3p表达升高，PFKFB3 mRNA表达降低(P<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-27b-3p直接靶向LncRNA NEAT1及PFKFB3的3′UTR区域。结论 LncRNA NEAT1通过负调控miR-27b-3p促进PFKFB3表达，驱动皮肤鳞状细胞癌细胞增殖、迁移及EMT进程，沉默LncRNA NEAT1可逆转上述效应。

关键词

LncRNA NEAT1 / miR-27b-3p / PFKFB3 / 皮肤鳞状细胞癌 / 恶性生物学行为