光老化成纤维细胞中m6A甲基化修饰的差异表达

摘要

目的 研究中波紫外线（UVB）诱导的光老化成纤维细胞及正常细胞中mRNA的N6-甲基腺苷（m6A）甲基化修饰水平的差异表达。方法 体外培养人成纤维细胞，用UVB照射建立光老化模型。将细胞分为对照组和照光组，对照组给予常规培养，照光组给予多次重复照射UVB（总剂量51 mJ/cm²）。采用CCK-8和流式法检测细胞活性及细胞周期，β-半乳糖苷酶检测细胞衰老，Western blot和qRT-PCR检测衰老标志物p16、p21和p53的蛋白及mRNA表达水平，m6A微阵列芯片检测m6A差异表达的mRNA谱，并通过基因本体论（GO）分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路分析进行结果分析。结果 通过UVB照射成功建立光老化模型。与对照组相比，照光组中m6A甲基化修饰差异表达的mRNA共2 749个，表达上调的有1 163个，表达下调的有1 586个（P<0.05且Fold change≥1.5）。GO富集分析发现差异表达的基因主要参与DNA重组修复、有丝分裂、应激、代谢等生物学过程；KEGG通路富集分析发现在p53、肿瘤坏死因子（TNF）、核转录因子kappa B（NF-κB）等通路明显富集。结论 UVB诱导的光老化成纤维细胞与正常细胞之间存在m6A甲基化修饰差异表达的mRNA,这些差异表达的mRNA可以为后续临床研究提供思路。

关键词

光老化 / 成纤维细胞 / N6-甲基腺苷甲基化 / mRNA

基金资助

国家自然科学基金项目(81972961)