固本化湿方治疗DNCB诱导的特应性皮炎小鼠的作用机制

摘要

目的 探索性研究固本化湿方治疗特应性皮炎（AD）可能的作用机制。方法 首先通过分子对接分析固本化湿方的活性化合物成分与丝聚蛋白（FLG）及芳香烃受体（AHR）之间的结合能力。随后通过1-氯-2,4-二硝基苯（2,4-dinitrochlorobenzene, DNCB）诱导刺激的AD小鼠模型进一步验证，连续造模给药28 d后观察小鼠皮损严重程度和经表皮水分丢失（TEWL）,HE染色观察组织病理、瘙痒回合数、脾脏指数、耳廓厚度。Western blot和免疫组织化学染色检测皮肤屏障相关蛋白的表达以及AHR、OVOL1蛋白的表达水平；ELISA检测血清中IgE、IL-13和IL-22含量，流式细胞术检测淋巴结中Th1、Th2、Th17占CD4⁺T细胞的比例。多因子液相芯片法检测多因子水平。结果 分子对接结果显示，目标靶点与固本化湿方关键化合物成分之间有较强的结合能力。动物实验结果显示，与AD模型组相比，治疗后，固本化湿方降低了皮损严重程度、TEWL、瘙痒回合数和耳廓厚度（P<0.05）,下调淋巴结中Th1、Th2、Th17比例，改善血清中IgE、IL-13和IL-22水平；固本化湿方治疗后，上调FLG、IVL、LOR、Occludin、AHR和OVOL1的表达水平，IL-1β、IL-4、IL-5和IL-33的表达显著下降（P<0.05）。结论 固本化湿方可能通过激活AHR/OVOL1/FLG轴促进皮肤屏障功能障碍和免疫平衡紊乱，从而达到治疗或抑制特应性皮炎病情发展的作用。

关键词

特应性皮炎 / 固本化湿方 / 皮肤屏障 / 免疫平衡紊乱 / T细胞亚群

基金资助

国家自然科学基金面上项目(82274521); 省部共建中医湿证国家重点实验室(广州中医药大学第二附属医院)(SZ2021ZZ39); 粤港澳中医药与免疫疾病研究联合实验室(2020B1212030006); 第八届中国科协青年人才托举工程(YESS20220609)