褪黑素通过抑制硬皮病病理性氧化应激改善其皮肤纤维化

李丹; 孙思宇; 廖羽青; 黄小芳; 凌永进; 罗婧莹

doi:10.13735/j.cjdv.1001-7089.202405109

中国皮肤性病学杂志 ›› 2025, Vol. 39 ›› Issue (10) : 1083 -1092. DOI: 10.13735/j.cjdv.1001-7089.202405109

褪黑素通过抑制硬皮病病理性氧化应激改善其皮肤纤维化

李丹, 孙思宇, 廖羽青, 黄小芳, 凌永进, 罗婧莹

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摘要

目的探究褪黑素(MLT)是否通过调节硬皮病体内病理性氧化应激(OS)失衡起到改善硬皮病皮肤纤维化的作用。方法采用博来霉素(BLM)建立硬皮病小鼠模型，将BALB/C小鼠随机分为对照组、BLM组以及MLT 10mg/kg治疗组(MLT-10)、20mg/kg治疗组(MLT-20)和30mg/kg治疗组(MLT-30)。硫代巴比妥酸(TBA)法及水溶性四唑盐-1(WST-1)法检测造模过程中皮肤中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的动态变化；HE染色及Masson染色观察各组小鼠皮损的病理变化，碱水解法检测各组小鼠皮肤中的羟脯氨酸(HYP)含量；Western blot实验及qRT-PCR技术检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、转化生长因子-β(TGF-β)、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达情况。体外培养人皮肤成纤维细胞(HSF),将HSF分为对照组、BLM组、BLM+MLT组及MLT组，Western blot实验检测Nrf2、HO-1、TGF-β、CollagenⅠ、CollagenⅢ的表达情况，并检测各组细胞的活性氧(ROS)和MDA、SOD水平。结果与对照组相比，造模14 d后BLM组小鼠皮肤的SOD水平及造模28 d后BLM组小鼠皮肤中MDA及SOD水平显著升高(P<0.05)。高剂量MLT(MLT-30)能明显降低硬皮病小鼠背部皮肤的真皮厚度、胶原密度及HYP含量(P<0.01),抑制TGF-β、CollagenⅠ、CollagenⅢ的蛋白水平(P<0.05),增加Nrf2和HO-1的蛋白水平(P<0.05)。在细胞实验中，MLT抑制BLM诱导的HSF胶原合成以及TGF-β表达，增加HSF中的Nrf2水平(P<0.05);此外，BLM处理后，HSF中MDA水平显著升高，SOD则显著降低，而MLT可以降低MDA水平，上调SOD水平(P<0.05)。结论硬皮病小鼠体内存在病理性OS失衡，MLT通过抑制TGF-β和ROS水平，提高Nrf2水平，显著减轻了BLM诱导的硬皮病小鼠皮肤硬化，抑制了HSF中胶原的过度产生，并纠正了病理性OS失衡。