特应性皮炎中miR-22介导HMGB1-NLRP3信号通路的调控机制

摘要

目的 探讨微小RNA(microRNA, miR)-22与高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein, HMGB1)-NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain containing protein 3, NLRP3)之间的关系，及其在特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)中的调节作用。方法 将30只BALB/c小鼠随机分为对照(control)组、模型(model)组、HMGB1抑制剂甘草酸苷(glycyrrhizin)处理组，每组10只。测量小鼠耳部及背部皮肤厚度变化；HE染色观察小鼠炎性细胞浸润情况；甲苯胺蓝染色观察小鼠肥大细胞浸润及脱颗粒情况。培养人永生化角质形成细胞(HaCaT),HaCaT细胞分别转染miR-22模拟剂(mimic)、miR-22抑制剂(inhibitor)、ov-NLRP3、si-NLRP3、si-HMGB1或经脂多糖(LPS)过表达HMGB1。采用qRT-PCR技术和Western blot实验分析各组小鼠及细胞miR-22、HMGB1、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶-1(caspase-1)和IL-1β的mRNA及蛋白表达；ELISA实验检测炎症因子IL-1β、IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、IL-17、IL-33的表达。结果 与对照组相比，模型组小鼠皮肤组织中miR-22的表达明显降低(P<0.01),HMGB1、NLRP3 mRNA的表达明显升高(P<0.01),ASC、caspase-1和IL-1β的表达表现出与NLRP3相似的趋势(P<0.01);与模型组相比，HMGB1抑制剂处理后小鼠皮肤厚度显著降低(P<0.05),炎性细胞浸润减少，肥大细胞数量及脱颗粒数量显著减少(P<0.01)。HaCaT细胞中，miR-22 mimic组、si-NLRP3组和si-HMGB1组NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β的表达水平降低(P<0.05),炎症因子IL-1β、IL-4、IL-5、IL-13、IL-17、IL-33的表达水平显著降低(P<0.05),ov-NLRP3的转染和HMGB1的过表达削弱了miR-22 mimic对上述指标的抑制作用(P<0.01)。结论 过表达的miR-22通过抑制HMGB1-NLRP3信号通路来抑制AD炎症水平，从而抑制AD的进展。

关键词

特应性皮炎 / 微小RNA-22 / 高迁移率族蛋白B1 / NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3

基金资助

国家自然科学基金项目(82060573,82060008,82360620); 吉林省科技厅项目(YDZJ202201ZYTS140)