CaSR/MAPK信号通路在UVB诱导HaCaT细胞光损伤中的作用

摘要

目的 探究钙敏感受体(calcium-sensing receptor, CaSR)是否通过p38 MAPK通路调控中波紫外线(UVB)诱导永生化人表皮角质形成细胞(HaCaT)的增殖与凋亡，探讨CaSR在皮肤光损伤防治中的潜在作用。方法 免疫组织化学染色检测CaSR在皮肤光损伤相关疾病中的表达情况。以HaCaT细胞株为研究对象，随机分为6组：对照组、UVB组、CaSR激动剂组、CaSR抑制剂+UVB组、p38抑制剂+UVB组、CaSR抑制剂+p38激动剂+UVB组，采用CCK-8实验和流式细胞术检测各组细胞的增殖与凋亡情况；Western blot检测各组细胞中CaSR、磷酸化(p)-p38、p38、Bax、Bcl2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达情况；免疫荧光检测CaSR在各组HaCaT细胞中的定位及表达情况。结果 鳞状细胞癌、基底细胞癌、日光性角化病、黑色素瘤皮损组织中CaSR表达显著高于正常皮肤(P<0.05)。HaCaT细胞经不同剂量UVB照射后，细胞存活率下降，且与照射剂量存在依赖关系(P<0.05)。与对照组细胞相比，UVB照射或CaSR激动剂处理可抑制HaCaT细胞增殖，使HaCaT细胞凋亡明显增加(P<0.05);而CaSR和p38抑制剂可减轻UVB辐射对HaCaT细胞增殖的抑制，细胞凋亡率显著下降(P<0.05)。与对照组相比，UVB照射显著升高HaCaT中CaSR、p-p38/p38、Bax/Bcl2及Caspase-3的表达(P<0.05),CaSR激动剂显著升高p-p38/p38和Caspase-3表达(P<0.05);而CaSR和p38抑制剂处理后可显著下调p-p38/p38、Bax/Bcl2及Caspase-3表达(P<0.05)。免疫荧光结果示，CaSR主要分布在HaCaT细胞的细胞质和细胞膜，UVB组较对照组CaSR表达明显上调；CaSR抑制剂+UVB组较UVB组CaSR表达明显下调(P<0.05)。结论 CaSR可能通过p38 MAPK信号通路调控UVB诱导的皮肤角质形成细胞的增殖和凋亡，参与了皮肤光损伤相关疾病的发生与发展，可作为诊治皮肤光损伤的潜在靶点。

关键词

钙敏感受体 / p38 MAPK / 中波紫外线 / 人角质形成细胞 / 光损伤

基金资助

河北省教育厅项目(ZD2022002); 邯郸市科技局项目(19422083008-67)