脱氢肋骨内酯对IgE诱导的RBL-2H3细胞活化的调节作用

赵怡心; 杨桂红; 王安辉; 雷霞; 黄显琼

doi:10.13735/j.cjdv.1001-7089.202409033

中国皮肤性病学杂志 ›› 2025, Vol. 39 ›› Issue (5) : 527 -534. DOI: 10.13735/j.cjdv.1001-7089.202409033

脱氢肋骨内酯对IgE诱导的RBL-2H3细胞活化的调节作用

赵怡心, 杨桂红, 王安辉, 雷霞, 黄显琼

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

摘要

目的探讨脱氢肋骨内酯（dehydrocostus lactone, DCL）对IgE诱导的肥大细胞（RBL-2H3）活化的影响及其潜在机制。方法采用CCK-8法评估DCL对RBL-2H3细胞活力的影响，筛选出合适的DCL作用浓度。构建DNP-IgE/BSA诱导的RBL-2H3细胞脱颗粒模型，通过Giemsa染色观察细胞形态变化，测定细胞上清液中β-氨基己糖苷酶（β-Hex）、组胺、白细胞介素-4（IL-4）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的释放水平以分析脱颗粒率。利用Fluo-4 AM荧光探针检测细胞内Ca²⁺水平的变化，并通过Western blot实验检测DCL对MAPK信号通路中p-ERK、ERK、p-P38和P38表达的影响。结果 DCL在浓度<3μg/mL时对RBL-2H3细胞活力无显著影响（P>0.05）,因此选择1μg/mL和2μg/mL作为实验浓度。Giemsa染色结果显示，DCL处理显著减少了模型组中细胞核增大的巨细胞数量（P<0.05）。DCL处理组β-Hex释放率较模型组显著降低（P<0.05）,且呈浓度依赖性降低组胺（P<0.05）、IL-4（P<0.05）和TNF-α（P<0.05）的释放水平。Fluo-4 AM荧光探针检测发现，DCL处理显著降低了RBL-2H3细胞内的Ca²⁺水平（P<0.05）。Western blot结果显示，DCL显著抑制了MAPK信号通路中p-ERK（P<0.05）和p-P38（P<0.05）的磷酸化水平，而对总ERK和P38的表达无显著影响。结论 DCL通过抑制细胞内Ca²⁺内流和MAPK信号通路的激活，有效抑制了IgE诱导的RBL-2H3细胞活化，为开发新型抗过敏药物提供了实验依据。