敲除Chk2对UVB辐射诱导小鼠皮肤损伤的保护作用及分子机制

摘要

目的 探讨细胞周期检测点激酶2（Chk2）基因缺失对中波紫外线（UVB）辐射后小鼠皮肤损伤的影响及机制。方法 将野生型（WT）C57BL/6J小鼠分为WT对照组、WT+UVB组，Chk2敲除（KO）小鼠分为KO对照组、KO+UVB组，对背部面积约3.0 cm×3.0 cm范围脱毛后进行造模，给予强度0.17 mW/cm²的UVB照射，30 min/d,连续7 d。HE染色检测皮损组织的形态学改变；Masson染色检测皮损组织的胶原分布；荧光定量PCR检测Chk1,Chk2,基质金属蛋白酶（MMP）1、2、3、9,胶原蛋白（Col）-Ⅰ,Col-Ⅲ的mRNA表达水平；Western blot检测Chk1、Chk2、磷酸化细胞分裂周期素25A（p-CDC25A）、裂解型caspase-3（Cleaved caspase-3）的蛋白表达水平。结果 WT+UVB组小鼠皮损组织中Chk1的mRNA及蛋白表达水平与WT对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）,Chk2的mRNA及蛋白表达水平均高于WT对照组（P<0.05）;敲除Chk2后，KO对照组、KO+UVB组小鼠皮损组织中均不表达Chk2。WT+UVB组小鼠皮损组织中表皮增厚、胶原变薄且排列混乱，p-CDC25A、Cleaved caspase-3的蛋白表达水平及MMP1、2、3、9的mRNA表达水平高于WT对照组，Col-Ⅰ、Col-Ⅲ的mRNA表达水平低于WT对照组（P<0.05）;与WT+UVB组比较，KO+UVB组小鼠皮损组织中表皮变薄、胶原增厚且排列整齐，p-CDC25A、Cleaved caspase-3的蛋白表达水平及MMP1、2、3、9的mRNA表达水平降低，Col-Ⅰ、Col-Ⅲ的mRNA表达水平增加（P<0.05）。结论 Chk2基因缺失可减轻UVB辐射后小鼠皮肤损伤，抑制胶原降解及细胞凋亡是其可能的分子机制。

关键词

中波紫外线 / 皮肤损伤 / 细胞周期检测点激酶2 / 基因敲除

基金资助

苏州市科技局指导性项目(SYSD2020091); 苏州卫生职业技术学院课题(SZWZY202422); 苏州卫生职业技术学院2024年度横向科研立项课题(HXKT202408)