野生大叶蔷薇果实醇提物对TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖及炎症反应的作用和机制探讨

摘要

目的 运用基于代谢组学和蛋白质组学的网络药理学，研究大叶蔷薇果实醇提物(ethanolic extract of Rosa macrophylla Lindl.Fruits, EERMF)是否具有银屑病治疗潜力及其作用机制，并通过体外细胞实验加以验证。方法 利用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)技术对EERMF的化学成分进行分析；采用CCK-8法和ELISA试验评估EERMF对TNF-α刺激下HaCaT细胞增殖及炎症反应的影响；采用4D Label Free定量蛋白质组学方法分析EERMF作用下HaCaT细胞中的差异蛋白表达；利用网络药理学方法筛选大叶蔷薇果实治疗银屑病的有效成分和作用靶点，并预测其发挥作用的相关信号通路；利用Hoechst33258染色法检测TNF-α刺激下HaCaT细胞的凋亡水平；利用Western blot检测相关通路蛋白表达水平及其磷酸化水平。结果 体外细胞实验结果显示，EERMF可显著抑制TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖和炎症反应；网络药理学结果分析表明，EERMF可通过草夹竹桃苷、松柏醛、阿魏酸等关键成分，作用于NFKB1、PLAU、RELA等NF-κB通路相关靶点，调控Bcl-2/Bax相关凋亡信号通路以及抑制NF-κB信号通路而起到治疗银屑病的作用。结论 EERMF可通过多成分、多靶点调控凋亡信号通路和NF-κB信号通路而实现对HaCaT细胞增殖与炎症反应的双重调节。

关键词

大叶蔷薇 / 银屑病 / 网络药理学 / 细胞凋亡 / NF-κB信号通路

基金资助

国家自然科学基金面上项目(32370407); 民族医药教育部重点实验室开放项目(KLEM-ZZ202403); 中央民族大学本科生创新训练计划(URTP2024110162)