铁皮石斛多糖通过SPHK1/S1P/NF-κB信号通路改善银屑病样状态

摘要

目的 探究铁皮石斛多糖(DOP)通过介导鞘氨醇激酶1(SPHK1)水平调控鞘脂代谢改善银屑病样状态的作用及具体机制。方法 建立白细胞介素(IL)-22诱导的银屑病细胞模型和咪喹莫特(IMQ)诱导的动物模型,并进行DOP干预。通过KEGG通路富集分析银屑病患者脂质代谢物差异;CCK-8法检测HaCaT细胞增殖活力;ELISA检测炎症因子和磷酸鞘氨醇-1-磷酸(S1P)水平;Western blot检测鞘脂代谢和NF-κB通路相关蛋白表达水平;qPCR检测SPHK1 mRNA水平;HE染色观察病理状态;银屑病面积和严重程度指数(PASI)评分评估银屑病样症状。结果 KEGG通路富集分析显示银屑病进展中伴随鞘脂代谢紊乱及S1P水平上调。细胞实验中,与对照组相比,IL-22组细胞增殖活性显著上调,炎症因子IL-17A、IL-23及IL-1β水平显著上调,鞘脂代谢相关蛋白SPHK1、SPHK2、SPTLC2、ASAH1水平及S1P水平均显著上调(P<0.05);与IL-22组相比,DOP干预后细胞增殖活性显著下调,炎症因子水平显著下调,鞘脂代谢相关蛋白均下调,SPHK1变化差异最显著,S1P水平显著下调(P<0.05)。qPCR和Western blot验证过表达(overexpression, OE)-SPHK1成功转染细胞。OE-SPHK1进一步提高了IL-22造成的S1P高表达,DOP干预后S1P水平显著下调(P<0.05)。Western blot结果显示,DOP干预能显著下调细胞模型中IKKβ、p-p65/p65水平,SPHK1过表达会抑制DOP的干预效果(P<0.05)。动物实验进一步证实了DOP能够有效缓解小鼠银屑病样皮肤损伤和炎症,并且抑制鞘脂代谢蛋白表达和NF-κB通路激活。结论 SPHK1可能是DOP恢复鞘脂代谢平衡,抑制NF-κB通路激活改善银屑病模型的异常增殖和炎症反应的关键作用靶点。

关键词

银屑病 / 铁皮石斛多糖 / 鞘脂代谢 / 鞘氨醇激酶1

基金资助

湖南省自然科学基金面上项目(2023JJ30468); 湖南省中医皮肤临床医学研究中心(2023SK4036); 湖南省中医药管理局一般课题(B2024086)